大鼠肝肺综合征模型的研究
王新国,韩德五,张慧英, 山西医科大学肝病研究所 山西省太原市 030001
王新国,男, 1973-01-12生, 山东省临沭县人, 汉族, 2002年山西医科大学硕士生,主要从事肝肺综合征研究.
项目负责人:韩德五, 030001, 山西省太原市新建南路86号, 山西医科大学肝病研究所.smuhan@public.ty.sx.cn
电话: 0351-4690082 传真：0351-4690865
收稿日期: 2004-12-08 接受日期: 2004-12-16
A rat model of hepatopulmonary syndrome
, http://www.100md.com
Xin-Guo Wang, De-Wu Han, Hui-Ying Zhang
Xin-Guo Wang,De-Wu Han, Hui-Ying Zhang, Institute of Hepatology, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China
Correspondence to: De-Wu Han, Institute of Hepatology, Shanxi Medical University, 86 Xinjian South Road, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China. smuhan@public.ty.sx.cn
Received: 2004-12-08 Accepted: 2004-12-16
, http://www.100md.com
Abstract
AIM: To establish an animal model of hepatopulmonary syndrome.
METHODS: Twenty Wistar rats were randomly divided into two groups: control group and model group. The rats in control group were fed with regular food and those in model group with food consisting of corn flour, cholesterol (5% w/w) and alcohol (300 mL/L). The model rats were then administered with 400 mL/L CCl4 (diluted by corn oil, 3 mL/kg) subcutaneously every four days. All ratswere killed at the end of the eighth week. Plasma ALT and AST, liverhydroxyproline and blood oxygen of the abdominal aorta were measured. Theratio of brain-over-lung 99mTc-polymerizedalbumin radioactivity was calculated. Right liver and lung lobe were fixedin 40 g/L phosphate buffered formaldehyde before HE and VG staining wereperformed.
, http://www.100md.com
RESULTS: The animal model of hepatopulmonary syndrome wassuccessfully established. Typical characteristics of cirrhosis wasobserved in the liver. Arterial blood oxygen content was decreased.Alveolar-arterial oxygen partial pressure difference (AaDO2) was increased. Pulmonary blood vessels were expanded markedly.
CONCLUSION: The animal cirrhotic model induced by compound factors is ideal for the study of hepatopulmonary syndrome.
, http://www.100md.com
Key Words: Hepatopulmonary syndrome; Animal model
Wang XG, Han DW, Zhang HY. A rat model of hepatopulmonary syndrome. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2005;13(4):521-523
摘要
目的:建立实验性肝肺综合征动物模型.
方法:Wistar♂大鼠20只随机分成正常组和模型组;正常组给予正常饲料和自来水，模型组以掺入胆固醇的玉米面作饲料，胆固醇占饲料重量的5%(前2 wk的每千克饲料中含有200 g猪油)，以300mL/L酒精作为其唯一饮料.在实验第1 d脊背sc 5mL/kg四氯化碳原液，以后每隔3 d sc 400 mL/L四氯化碳(用玉米油稀释)，按3mL/kg给予.于8 wk末处死动物，腹主动脉取血，右肝和右肺用40 g/L多聚甲醛固定;左肝950mL/L酒精固定.检测ALT，AST;测定肝脏羟脯氨酸，用氯胺T法;肝脏HE、VG染色;肺HE染色;腹主动脉血氧检测;尾静脉注射99m锝-多聚白蛋白肺脑放射活性扫描.
, 百拇医药
结果:肝硬化形成，肺泡-动脉氧分压差增大，血氧含量降低，肺血管明显扩张.
结论:复合因素造成的模型能够作为肝肺综合征的实验动物模型.
关键词:肝肺综合征; 动物模型
王新国, 韩德五, 张慧英. 大鼠肝肺综合征模型的研究.世界华人消化杂志 2005;13(4):521-523
1 肝脏的大体形态: 表面大小不等小米粒状结节，边缘变锐.
图2 肺泡间隔增宽，肺泡腔减小，毛细血管扩张，伴有部分肺不张(HE´100)
, http://www.100md.com
3 讨论HPS实际上是基础肝病-肺血管扩张-动脉血氧化合功能障碍构成的三联征，但目前对肝肺综合征的诊断尚缺乏统一标准.Rodriguez-Roisin et al[4]提出4条诊断标准:(1)有慢性肝病或严重肝病存在，伴有或无严重肝功能不全;(2)无原发性心肺疾病，胸片正常或有间质结节状阴影;(3)肺气体交换异常，有或无低氧血症，但肺泡—动脉氧梯度增大，超过2.0kPa;(4)肺内放射核素标记物或二维超声心动图提示肺内血管异常扩张.张宏博 et al[5]观察99m锝-多聚白蛋白动态肺灌注扫描在肝肺综合征早期改变，发现99m锝—多聚白蛋白动态肺灌注是反映HPS早期的较敏感的监测指标.我们发现，8 wk后模型组动物100%形成肝硬化，腹主动脉血氧含量低，肺泡—动脉氧梯度增加，尾静脉注射99m锝—多聚白蛋白肺脑放射扫描结果提示肺血管扩张.同时，此模型肝脏病理改变典型，肺部的改变与倪醒之et al[6]用四氯化碳诱导门脉高压所复制动物模型和Schraufnagelet al[7]胆总管结扎造成的胆汁性肝硬化所伴有的肺毛细血管以及巨噬细胞增多等病理改变大体一致.按照Fallon et al[8]和Abrams et al[9]诊断程序，我们认为，此模型可以作为肝肺综合征动物模型.
, http://www.100md.com
一个理想的动物模型条件是:与人类疾病特征相似，病变有一定的发展过程，形成率高，死亡率低，重复性好，造模简便
易行[10].复合因素造成的肝硬化模型自1972年建立以来，经过多年实践证实，肝硬化形成率高，重复性好，肝脏病理阶段性变化分明[11];与目前比较通用的慢性胆总管结扎造模(CBDL)相比，用复合因素造模具有以下特点:(1)从临床肝硬化形成的病因来看，复合因素导致肝脏病变更贴近临床，CBDL则是单纯胆总管结扎，造成胆汁淤积性肝硬化;(2)复合因素是利用四氯化碳慢性中毒，低蛋白和胆碱等营养因素致成肝细胞坏死—脂肪变—肝纤维化—肝硬化，符合肝硬化的发生发展各阶段;(3)复合因素所致模型可以应用于多种因素引起的肝硬化及肝硬化基础上出现的肝肺综合征的发病机制研究;(4)从死亡率来看，复合因素死亡率低，CCBDL则较高[12].根据倪醒之et al[6]对CCl4是否在肝肺综合征的形成过程中对肺组织有损坏作用研究，我们排除了低氧血症是由CCl4对肺损伤造成的.因此，本实验应用复合因素所致的肝硬化模型是研究肝肺综合征较为理想的动物模型.
, 百拇医药
4 参考文献1 Krowka MJ. Hepatopulmonary syndromes. Gut 2000;46:1-4
2 Hopkins WE, Waggoner AD, Barzilai B. Frequency and significance ofintrapulmonary right-to-left shunting in
end-stage hepatic disease. Am J Cardiol 1992;70:516-519
3 Krowka MJ. Clinical management of hepatopulmonary syndrome. SeminLiver Dis 1993;13:414-422
, 百拇医药
4 Rodriguez-Roisin R, Agusti A, Roca J. The hepatopulmonary syndrome:new name, old complexities. Thorax
1992;47:879-902
5 张宏博, 柏长青, 汪静, 韩国宏, 郭学刚, 周新民, 吴开春, 丁杰, 樊代明. 99m锝-多聚白蛋白动态肺灌注扫描
在肝肺综合征早期诊断中的意义. 中华肝脏病杂志 2001;9:331-333
6 倪醒之, 吴志勇, 陈治平, 邝耀麟. 门静脉高压症大鼠肺组织结构变化与低氧血症的关系.
中华普通外科杂志 2001;16:400-403
, 百拇医药
7 Schraufnagel DE, Patel KR. Sphincters in pulmonary veins. Ananatomic study in rats. Am Rev Respir Dis
1990;141:721-726
8 Fallon MB, Abrams GA. Pulmonary dysfunction in chronic liverdisease. Hepatology 2000;32:859-865
9 Abrams G, Nanda N, Dubovsky EV, Krowka MJ, Fallon MB. Use ofmacroaggregated albumin lung perfusion scan
to diagnose hepatopulmonary syndrome:a newapproach. Gastroenterology 1998;114:305-310
10 孙敬方. 动物实验方法学. 第1版. 北京:人民卫生出版社, 2002:462-463
11 韩德五, 马学惠, 赵元昌. 肝硬化动物模型的研究. 山西医药杂志1979;4:1-6
12 马学惠. 肝纤维化动物模型的造模方法. 中华肝脏病杂志 1996;4:58-61
编辑 潘伯荣 审读 张海宁, http://www.100md.com( 王新国,韩德五, 张慧英)
王新国,男, 1973-01-12生, 山东省临沭县人, 汉族, 2002年山西医科大学硕士生,主要从事肝肺综合征研究.
项目负责人:韩德五, 030001, 山西省太原市新建南路86号, 山西医科大学肝病研究所.smuhan@public.ty.sx.cn
电话: 0351-4690082 传真：0351-4690865
收稿日期: 2004-12-08 接受日期: 2004-12-16
A rat model of hepatopulmonary syndrome
, http://www.100md.com
Xin-Guo Wang, De-Wu Han, Hui-Ying Zhang
Xin-Guo Wang,De-Wu Han, Hui-Ying Zhang, Institute of Hepatology, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China
Correspondence to: De-Wu Han, Institute of Hepatology, Shanxi Medical University, 86 Xinjian South Road, Taiyuan 030001, Shanxi Province, China. smuhan@public.ty.sx.cn
Received: 2004-12-08 Accepted: 2004-12-16
, http://www.100md.com
Abstract
AIM: To establish an animal model of hepatopulmonary syndrome.
METHODS: Twenty Wistar rats were randomly divided into two groups: control group and model group. The rats in control group were fed with regular food and those in model group with food consisting of corn flour, cholesterol (5% w/w) and alcohol (300 mL/L). The model rats were then administered with 400 mL/L CCl4 (diluted by corn oil, 3 mL/kg) subcutaneously every four days. All ratswere killed at the end of the eighth week. Plasma ALT and AST, liverhydroxyproline and blood oxygen of the abdominal aorta were measured. Theratio of brain-over-lung 99mTc-polymerizedalbumin radioactivity was calculated. Right liver and lung lobe were fixedin 40 g/L phosphate buffered formaldehyde before HE and VG staining wereperformed.
, http://www.100md.com
RESULTS: The animal model of hepatopulmonary syndrome wassuccessfully established. Typical characteristics of cirrhosis wasobserved in the liver. Arterial blood oxygen content was decreased.Alveolar-arterial oxygen partial pressure difference (AaDO2) was increased. Pulmonary blood vessels were expanded markedly.
CONCLUSION: The animal cirrhotic model induced by compound factors is ideal for the study of hepatopulmonary syndrome.
, http://www.100md.com
Key Words: Hepatopulmonary syndrome; Animal model
Wang XG, Han DW, Zhang HY. A rat model of hepatopulmonary syndrome. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2005;13(4):521-523
摘要
目的:建立实验性肝肺综合征动物模型.
方法:Wistar♂大鼠20只随机分成正常组和模型组;正常组给予正常饲料和自来水，模型组以掺入胆固醇的玉米面作饲料，胆固醇占饲料重量的5%(前2 wk的每千克饲料中含有200 g猪油)，以300mL/L酒精作为其唯一饮料.在实验第1 d脊背sc 5mL/kg四氯化碳原液，以后每隔3 d sc 400 mL/L四氯化碳(用玉米油稀释)，按3mL/kg给予.于8 wk末处死动物，腹主动脉取血，右肝和右肺用40 g/L多聚甲醛固定;左肝950mL/L酒精固定.检测ALT，AST;测定肝脏羟脯氨酸，用氯胺T法;肝脏HE、VG染色;肺HE染色;腹主动脉血氧检测;尾静脉注射99m锝-多聚白蛋白肺脑放射活性扫描.
, 百拇医药
结果:肝硬化形成，肺泡-动脉氧分压差增大，血氧含量降低，肺血管明显扩张.
结论:复合因素造成的模型能够作为肝肺综合征的实验动物模型.
关键词:肝肺综合征; 动物模型
王新国, 韩德五, 张慧英. 大鼠肝肺综合征模型的研究.世界华人消化杂志 2005;13(4):521-523
1 肝脏的大体形态: 表面大小不等小米粒状结节，边缘变锐.
图2 肺泡间隔增宽，肺泡腔减小，毛细血管扩张，伴有部分肺不张(HE´100)
, http://www.100md.com
3 讨论HPS实际上是基础肝病-肺血管扩张-动脉血氧化合功能障碍构成的三联征，但目前对肝肺综合征的诊断尚缺乏统一标准.Rodriguez-Roisin et al[4]提出4条诊断标准:(1)有慢性肝病或严重肝病存在，伴有或无严重肝功能不全;(2)无原发性心肺疾病，胸片正常或有间质结节状阴影;(3)肺气体交换异常，有或无低氧血症，但肺泡—动脉氧梯度增大，超过2.0kPa;(4)肺内放射核素标记物或二维超声心动图提示肺内血管异常扩张.张宏博 et al[5]观察99m锝-多聚白蛋白动态肺灌注扫描在肝肺综合征早期改变，发现99m锝—多聚白蛋白动态肺灌注是反映HPS早期的较敏感的监测指标.我们发现，8 wk后模型组动物100%形成肝硬化，腹主动脉血氧含量低，肺泡—动脉氧梯度增加，尾静脉注射99m锝—多聚白蛋白肺脑放射扫描结果提示肺血管扩张.同时，此模型肝脏病理改变典型，肺部的改变与倪醒之et al[6]用四氯化碳诱导门脉高压所复制动物模型和Schraufnagelet al[7]胆总管结扎造成的胆汁性肝硬化所伴有的肺毛细血管以及巨噬细胞增多等病理改变大体一致.按照Fallon et al[8]和Abrams et al[9]诊断程序，我们认为，此模型可以作为肝肺综合征动物模型.
, http://www.100md.com
一个理想的动物模型条件是:与人类疾病特征相似，病变有一定的发展过程，形成率高，死亡率低，重复性好，造模简便
易行[10].复合因素造成的肝硬化模型自1972年建立以来，经过多年实践证实，肝硬化形成率高，重复性好，肝脏病理阶段性变化分明[11];与目前比较通用的慢性胆总管结扎造模(CBDL)相比，用复合因素造模具有以下特点:(1)从临床肝硬化形成的病因来看，复合因素导致肝脏病变更贴近临床，CBDL则是单纯胆总管结扎，造成胆汁淤积性肝硬化;(2)复合因素是利用四氯化碳慢性中毒，低蛋白和胆碱等营养因素致成肝细胞坏死—脂肪变—肝纤维化—肝硬化，符合肝硬化的发生发展各阶段;(3)复合因素所致模型可以应用于多种因素引起的肝硬化及肝硬化基础上出现的肝肺综合征的发病机制研究;(4)从死亡率来看，复合因素死亡率低，CCBDL则较高[12].根据倪醒之et al[6]对CCl4是否在肝肺综合征的形成过程中对肺组织有损坏作用研究，我们排除了低氧血症是由CCl4对肺损伤造成的.因此，本实验应用复合因素所致的肝硬化模型是研究肝肺综合征较为理想的动物模型.
, 百拇医药
4 参考文献1 Krowka MJ. Hepatopulmonary syndromes. Gut 2000;46:1-4
2 Hopkins WE, Waggoner AD, Barzilai B. Frequency and significance ofintrapulmonary right-to-left shunting in
end-stage hepatic disease. Am J Cardiol 1992;70:516-519
3 Krowka MJ. Clinical management of hepatopulmonary syndrome. SeminLiver Dis 1993;13:414-422
, 百拇医药
4 Rodriguez-Roisin R, Agusti A, Roca J. The hepatopulmonary syndrome:new name, old complexities. Thorax
1992;47:879-902
5 张宏博, 柏长青, 汪静, 韩国宏, 郭学刚, 周新民, 吴开春, 丁杰, 樊代明. 99m锝-多聚白蛋白动态肺灌注扫描
在肝肺综合征早期诊断中的意义. 中华肝脏病杂志 2001;9:331-333
6 倪醒之, 吴志勇, 陈治平, 邝耀麟. 门静脉高压症大鼠肺组织结构变化与低氧血症的关系.
中华普通外科杂志 2001;16:400-403
, 百拇医药
7 Schraufnagel DE, Patel KR. Sphincters in pulmonary veins. Ananatomic study in rats. Am Rev Respir Dis
1990;141:721-726
8 Fallon MB, Abrams GA. Pulmonary dysfunction in chronic liverdisease. Hepatology 2000;32:859-865
9 Abrams G, Nanda N, Dubovsky EV, Krowka MJ, Fallon MB. Use ofmacroaggregated albumin lung perfusion scan
to diagnose hepatopulmonary syndrome:a newapproach. Gastroenterology 1998;114:305-310
10 孙敬方. 动物实验方法学. 第1版. 北京:人民卫生出版社, 2002:462-463
11 韩德五, 马学惠, 赵元昌. 肝硬化动物模型的研究. 山西医药杂志1979;4:1-6
12 马学惠. 肝纤维化动物模型的造模方法. 中华肝脏病杂志 1996;4:58-61
编辑 潘伯荣 审读 张海宁, http://www.100md.com( 王新国,韩德五, 张慧英)
