基质金属蛋白酶-2,-9及铁蛋白对鉴别良恶性腹水的意义
韩明子, 范玉晶, 王双双, 哈尔滨医科大学附属第二医院消化内科 黑龙江省哈尔滨市 150086
通讯作者:韩明子, 150086, 黑龙江省哈尔滨市, 哈尔滨医科大学附属第二医院消化内科. hanmingzi@medmail.com.cn
电话: 0451-86605143
收稿日期: 2005-02-28 接受日期: 2005-03-22
摘要
目的:检测良恶性腹水中MMP-2，MMP-9及SF的含量，为鉴别良恶性腹水提供科学依据.
, 百拇医药 方法:收集腹水患者37例，其中肝硬化腹水12例，结核性腹膜炎腹水13例，消化系恶性肿瘤腹水12例.采用ELISA法分别检测腹水中MMP-2 ，MMP-9及SF的含量.
结果:消化系恶性肿瘤组中MMP-2，SF含量依次为(161.85±85.88)mg/L，(458.47±47.05)mg/L，明显高于肝硬化组[(93.00±31.69)mg/L，(188.80±148.35)mg/L]和结核性腹膜炎组[(107.11±38.70)mg/L，(218.16±30.88)mg/L]，(P<0.05，P<0.001).MMP-9在肝硬化腹水、消化系恶性肿瘤腹水、结核性腹膜炎腹水中依次升高，分别为(9.02±2.18)mg/L、(18.36±8.26)mg/L、(48.90±16.37)mg/L.
结论:MMP-2，SF在恶性腹水中的表达量明显高于良性腹水组，MMP-9在结核性腹膜炎腹水中明显升高.因此MMP-2，MMP-9及SF可作为良恶性腹水的鉴别指标.
, 百拇医药
韩明子, 范玉晶, 王双双. 基质金属蛋白酶-2, -9及铁蛋白对鉴别良恶性腹水的意义. 世界华人消化杂志 2005;13(7):927-928
http://www.wjgnet.com/1009-3079/13/927.aspa
0 引言
临床上由消化系肿瘤引起的恶性腹水较常见，但其与良性腹水的鉴别往往十分困难.在腹水中查找癌细胞是鉴别良恶性腹水特异性最好的方法，但其阳性率较低并且检查为阴性者也不能完全排除肿瘤诊断的可能性.因此寻找一种可靠的腹水检测方法来鉴别良恶性腹水十分必要.我们测定37例患者腹水中基质金属蛋白酶-2，基质金属蛋白酶-9 (MMP-9，MMP-2)及铁蛋白(SF)的含量，并进行统计学分析，以期为临床良恶性腹水的鉴别提供科学依据.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 选择2004-07/2004-12哈尔滨医科大学附属第二医院住院患者腹水标本37例，其中男性患者30例，女性患者7例，年龄平均为45±6周岁.分为三组:(1)消化系恶性肿瘤组12例，其中胆囊癌1例，原发性腹膜癌4例，恶性间皮瘤2例，食管癌1例，直肠癌1例，原发性肝癌2例，胰头癌1例.均经过B超、CT、MRI及术后病理确诊.(2)结核性腹膜炎腹水组13例，该组患者依据结核中毒症状，腹腔镜检查及抗痨治疗后腹水消失等综合指标做出诊断.(3)肝硬化腹水组12例，均为乙型肝炎后肝硬化，经临床确诊排除各系统肿瘤并通过腹水常规除外自发性腹膜炎者.
1.2 方法 常规行腹腔穿刺术抽取腹水5 mL，3 000 r/min离心20 min，取上清液.按每次用量1 mL分装后置于-80℃冰箱冻存待测.分别用ELISA法检测腹水中MMP-2，MMP-9及SF含量.严格按照试剂盒要求进行操作.采用t检验对检测结果进行统计学分析.
, 百拇医药
2 结果各组腹水检测指标结果见表1.MMP-2在消化系恶性腹水组中的水平明显高于肝硬化和结核性腹膜炎组(P<0.05)，而在结核性腹膜炎及肝硬化组间无显著差异(P>0.05);MMP-9在3组腹水中均有显著差异(P<0.001)，且在肝硬化组、消化系肿瘤组、结核性腹膜炎组中依次升高;SF在肝硬化组、结核性腹膜炎组、消化系肿瘤组中依次升高，3组均有显著差异(P<0.001).
表1 各组腹水MMP-2，MMP-9，SF含量(mean±SD，mg/L)
aP<0.05vs肝硬化组,结核性腹膜炎组; bP<0.001vs结核性腹膜炎组，肝硬化组;dP<0.001vs肝硬化组.
, http://www.100md.com
3 讨论基质金属蛋白酶是一种肽链内切酶，对肿瘤的侵袭和转移产生重要作用[1-3].大量文献表明:基质金属蛋白酶特别是MMP-2及MMP-9与恶性肿瘤侵袭和转移的关系较为密切[4-8].MMP-2，MMP-9不仅可以降解细胞外基质成分，还能够降解IV型胶原，从而直接导致基底膜的破坏[9-11]，使肿瘤细胞释放入血.许多恶性肿瘤患者外周血中MMP-2，MMP-9的含量均有明显升高[14-17]，但在腹水中检测基质金属蛋白酶，国内外还少有研究.
MMP-2，MMP-9主要由肿瘤细胞及肿瘤周边间质细胞产生并释放入血，因而我们推测肿瘤细胞发生腹膜转移时也可将MMP-2，MMP-9释放入腹水，使恶性腹水中可以检测出MMP-2及MMP-9.我们的实验结果证明:MMP-2，MMP-9在肝硬化腹水组、消化系恶性肿瘤腹水组、结核性腹膜炎腹水组均有表达，且均有显著差异.而且在结核性腹膜炎组中MMP-9的平均值高于消化系肿瘤组的平均值，因此我们认为，腹水中MMP-9可能主要来源于宿主的炎症细胞和基质细胞，而不是肿瘤本身.另外，恶性肿瘤和结核性腹水中的MMP-9高于漏出液，这充分说明MMP-9不仅可以参与恶性腹水的生成，也与良性腹水的形成密切相关，考虑其机制与MMP-9降解基底膜从而导致毛细血管壁的通透性增强有关.本组研究显示:MMP-9在结核性腹膜炎腹水中的含量明显高与消化系肿瘤组，而消化系肿瘤组又明显高于肝硬化腹水组;同时MMP-2在恶性腹水中有较高表达，且与其他两组比较具有显著差异，所以我们认为MMP-2，MMP-9对良恶性腹水鉴别具有重要意义.
, 百拇医药
铁蛋白是一种含铁蛋白质复合物，广泛存在于肝、脾、骨髓中.正常人血清中可含少量铁蛋白.肿瘤细胞具有较强的合成铁蛋白异构体的能力.当机体患恶性肿瘤时，血清铁蛋白升高[18-20]，同时肿瘤组织也可将合成的铁蛋白直接释放入腹水，造成癌性腹水中铁蛋白含量明显升高.我们的实验结果显示:癌性腹水中SF含量显著高于良性腹水组，而肝硬化组又显著低于结核性腹膜炎组.因此，可以认为SF不仅可以用来鉴别良恶性腹水的性质，还可以用来鉴别结核与非结核性腹水.
总之，MMP-2，MMP-9及SF对鉴别良恶性腹水的性质具有重要意义，如联合检测将大大提高恶性腹水的检测率.
4 参考文献1 Liu HL, Li XH, Wang DY, Yang SP. Matrix metalloproteinase-2 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 expression in
, http://www.100md.com
fibro tic rat liver. World J Gastroenterol 2000;6:881-884
2 Curran S, Murray GI. Matrix metalloproteinase:molecular aspects of their roles in tumor invasion and metastasis.
Eur J Cancer 2000;36:16211630
3 Wassa ET, Lomme RM, DeGroot J, Wobbes T, Hendriks T. Tissue levels of active matrix metalloproteinase-2 and 9
in colorectal cancer. Br J Cancer 2002;86:1876-1883
, 百拇医药
4 Wang ZN, Xu HM. Relationship between collagen IV expression and biological behavior of gastric cancer.
World J Gastroenterol 2000;6:438-439
5 He YD, Zhao YW, Kong LF, Yin PZ. Activity alternating of matrix metalloproteinase-2 in hepatocellular carcinoma.
Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2000;8:925-953
6 Zhu ZY, Du Z, Wang YJ, Zhang W, Sun BC. Examination of Ecadherin and matrix metalloproteinase and its significance
, http://www.100md.com
in primary HCC. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2001;9:839-840
7 Coussens LM, Fingleton B, Matrisian LM. Matrix metalloproteinase inhibitors and cancer:trials and tribulations.
Science 2002;295:2387-2392
8 Egeblad M, Werb Z. New functions for the matrix metalloproteinases in cancer progression. Nat Rev Cancer
2002;2:161-174
, 百拇医药 9 Stracke JO, Hutton M, Stewar M, Pendas AM, Smith B, Lopezotin C, Murophy G, Knauper V. Biochemical characterization
of the catalytic domain of human matrix metalloproteinase 19. Evidence for a role as a potent basement membrane
degrading enzyme. J Biol Chem 2000;275:14809-14816
10 Uria JA, Lopez-Otin C. Matrilysin-2, a new matrix metallopro-teinase expressed in human tumors and showing the
, 百拇医药
minimal domain organization required for secretion, latency, and activity. Cancer Res 2000;60:4745-4751
11 Stock UA, Wiederschain D, Kilroy SM, Shum-Tim D, Khalil PN, Vacanti JP, Mayer Jr JE, Moses MA. Dynamics of
extracellular matrix production and turnover in tissue engineered cardiovascular structures. J Cell Biochem
2001;81:220-228
12 Lauer-Fields JL, Tuzinski KA, Shimokawa K, Nagase H, Fields GB. Hydrolysis of triple-helical collagen peptide models
, 百拇医药
by matrix metalloproteinasea. J Biol Chem 2000;275:13282-13290
13 Fan YJ, Han MZ. The relation of matrix metalloproteinase and digestive tumor. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi
2004;12:2174-2176
14 Kleiner DE, Stetler-Stevenson WG. Matrix metalloproteinases and metastasis. Cancer Chemother Pharmacol
1999;43(Suppl):S42-51
15 Ji F, Wang WL, Yang ZL, Li YM, Huang HD, Chen WD. Study on the expression of matrix metalloproteinase-2 mRNA
, 百拇医药
in human gastric cancer. World J Gastroenterol 1999;5:455-457
16 Jiang ZS, Gao Y, Biological feature of matrix metalloproteinase and its action in metastasis of liver cancer.
Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2000;8:1403-1404
17 Ellenrieder V, Alber B, Lacher U, Hendler SF, Menke A, BoeckW, Wagner M, Wilda M, Friess H, Buchler M, Adler G,Gress TM. Role of MT-MMPs and MMP-2 in pancreatic cancer progression. Int J Cancer 2000;85:14-20
, 百拇医药
18 Filie JD, Buckler CE, Kozak CA. Genetic mapping of the mouse ferritin light chain gene and 11 pseudogenes on 11
mouse chromosomes. Mamm Genome 1998;9:111-113
19 Juan SH, Aust SD. The effect of putative nuclestion sites on the loading and stability of iron in ferritin.
Arch Biochem Biophys 1998;350:259-265
20 Powell AK. Ferritin. Its mineralization. Met Ions Biol Syst 1998;35:515-561
编辑 张海宁, http://www.100md.com( 韩明子,范玉晶, 王双双)
通讯作者:韩明子, 150086, 黑龙江省哈尔滨市, 哈尔滨医科大学附属第二医院消化内科. hanmingzi@medmail.com.cn
电话: 0451-86605143
收稿日期: 2005-02-28 接受日期: 2005-03-22
摘要
目的:检测良恶性腹水中MMP-2，MMP-9及SF的含量，为鉴别良恶性腹水提供科学依据.
, 百拇医药 方法:收集腹水患者37例，其中肝硬化腹水12例，结核性腹膜炎腹水13例，消化系恶性肿瘤腹水12例.采用ELISA法分别检测腹水中MMP-2 ，MMP-9及SF的含量.
结果:消化系恶性肿瘤组中MMP-2，SF含量依次为(161.85±85.88)mg/L，(458.47±47.05)mg/L，明显高于肝硬化组[(93.00±31.69)mg/L，(188.80±148.35)mg/L]和结核性腹膜炎组[(107.11±38.70)mg/L，(218.16±30.88)mg/L]，(P<0.05，P<0.001).MMP-9在肝硬化腹水、消化系恶性肿瘤腹水、结核性腹膜炎腹水中依次升高，分别为(9.02±2.18)mg/L、(18.36±8.26)mg/L、(48.90±16.37)mg/L.
结论:MMP-2，SF在恶性腹水中的表达量明显高于良性腹水组，MMP-9在结核性腹膜炎腹水中明显升高.因此MMP-2，MMP-9及SF可作为良恶性腹水的鉴别指标.
, 百拇医药
韩明子, 范玉晶, 王双双. 基质金属蛋白酶-2, -9及铁蛋白对鉴别良恶性腹水的意义. 世界华人消化杂志 2005;13(7):927-928
http://www.wjgnet.com/1009-3079/13/927.aspa
0 引言
临床上由消化系肿瘤引起的恶性腹水较常见，但其与良性腹水的鉴别往往十分困难.在腹水中查找癌细胞是鉴别良恶性腹水特异性最好的方法，但其阳性率较低并且检查为阴性者也不能完全排除肿瘤诊断的可能性.因此寻找一种可靠的腹水检测方法来鉴别良恶性腹水十分必要.我们测定37例患者腹水中基质金属蛋白酶-2，基质金属蛋白酶-9 (MMP-9，MMP-2)及铁蛋白(SF)的含量，并进行统计学分析，以期为临床良恶性腹水的鉴别提供科学依据.
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 材料 选择2004-07/2004-12哈尔滨医科大学附属第二医院住院患者腹水标本37例，其中男性患者30例，女性患者7例，年龄平均为45±6周岁.分为三组:(1)消化系恶性肿瘤组12例，其中胆囊癌1例，原发性腹膜癌4例，恶性间皮瘤2例，食管癌1例，直肠癌1例，原发性肝癌2例，胰头癌1例.均经过B超、CT、MRI及术后病理确诊.(2)结核性腹膜炎腹水组13例，该组患者依据结核中毒症状，腹腔镜检查及抗痨治疗后腹水消失等综合指标做出诊断.(3)肝硬化腹水组12例，均为乙型肝炎后肝硬化，经临床确诊排除各系统肿瘤并通过腹水常规除外自发性腹膜炎者.
1.2 方法 常规行腹腔穿刺术抽取腹水5 mL，3 000 r/min离心20 min，取上清液.按每次用量1 mL分装后置于-80℃冰箱冻存待测.分别用ELISA法检测腹水中MMP-2，MMP-9及SF含量.严格按照试剂盒要求进行操作.采用t检验对检测结果进行统计学分析.
, 百拇医药
2 结果各组腹水检测指标结果见表1.MMP-2在消化系恶性腹水组中的水平明显高于肝硬化和结核性腹膜炎组(P<0.05)，而在结核性腹膜炎及肝硬化组间无显著差异(P>0.05);MMP-9在3组腹水中均有显著差异(P<0.001)，且在肝硬化组、消化系肿瘤组、结核性腹膜炎组中依次升高;SF在肝硬化组、结核性腹膜炎组、消化系肿瘤组中依次升高，3组均有显著差异(P<0.001).
表1 各组腹水MMP-2，MMP-9，SF含量(mean±SD，mg/L)
组别 | , 百拇医药 n | MMP-2 | MMP-9 | SF |
消化系肿瘤组 | 12 | 161.85±85.88a | 18.36±8.26b | 458.47±47.05b |
结核性腹膜炎组 | , 百拇医药 13 | 107.11±38.70 | 48.90±16.37d | 218.16±30.88d |
肝硬化组 | 12 | 98.00±31.69 | 9.02±2.18 | 188.80±148.35 |
aP<0.05vs肝硬化组,结核性腹膜炎组; bP<0.001vs结核性腹膜炎组，肝硬化组;dP<0.001vs肝硬化组.
, http://www.100md.com
3 讨论基质金属蛋白酶是一种肽链内切酶，对肿瘤的侵袭和转移产生重要作用[1-3].大量文献表明:基质金属蛋白酶特别是MMP-2及MMP-9与恶性肿瘤侵袭和转移的关系较为密切[4-8].MMP-2，MMP-9不仅可以降解细胞外基质成分，还能够降解IV型胶原，从而直接导致基底膜的破坏[9-11]，使肿瘤细胞释放入血.许多恶性肿瘤患者外周血中MMP-2，MMP-9的含量均有明显升高[14-17]，但在腹水中检测基质金属蛋白酶，国内外还少有研究.
MMP-2，MMP-9主要由肿瘤细胞及肿瘤周边间质细胞产生并释放入血，因而我们推测肿瘤细胞发生腹膜转移时也可将MMP-2，MMP-9释放入腹水，使恶性腹水中可以检测出MMP-2及MMP-9.我们的实验结果证明:MMP-2，MMP-9在肝硬化腹水组、消化系恶性肿瘤腹水组、结核性腹膜炎腹水组均有表达，且均有显著差异.而且在结核性腹膜炎组中MMP-9的平均值高于消化系肿瘤组的平均值，因此我们认为，腹水中MMP-9可能主要来源于宿主的炎症细胞和基质细胞，而不是肿瘤本身.另外，恶性肿瘤和结核性腹水中的MMP-9高于漏出液，这充分说明MMP-9不仅可以参与恶性腹水的生成，也与良性腹水的形成密切相关，考虑其机制与MMP-9降解基底膜从而导致毛细血管壁的通透性增强有关.本组研究显示:MMP-9在结核性腹膜炎腹水中的含量明显高与消化系肿瘤组，而消化系肿瘤组又明显高于肝硬化腹水组;同时MMP-2在恶性腹水中有较高表达，且与其他两组比较具有显著差异，所以我们认为MMP-2，MMP-9对良恶性腹水鉴别具有重要意义.
, 百拇医药
铁蛋白是一种含铁蛋白质复合物，广泛存在于肝、脾、骨髓中.正常人血清中可含少量铁蛋白.肿瘤细胞具有较强的合成铁蛋白异构体的能力.当机体患恶性肿瘤时，血清铁蛋白升高[18-20]，同时肿瘤组织也可将合成的铁蛋白直接释放入腹水，造成癌性腹水中铁蛋白含量明显升高.我们的实验结果显示:癌性腹水中SF含量显著高于良性腹水组，而肝硬化组又显著低于结核性腹膜炎组.因此，可以认为SF不仅可以用来鉴别良恶性腹水的性质，还可以用来鉴别结核与非结核性腹水.
总之，MMP-2，MMP-9及SF对鉴别良恶性腹水的性质具有重要意义，如联合检测将大大提高恶性腹水的检测率.
4 参考文献1 Liu HL, Li XH, Wang DY, Yang SP. Matrix metalloproteinase-2 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 expression in
, http://www.100md.com
fibro tic rat liver. World J Gastroenterol 2000;6:881-884
2 Curran S, Murray GI. Matrix metalloproteinase:molecular aspects of their roles in tumor invasion and metastasis.
Eur J Cancer 2000;36:16211630
3 Wassa ET, Lomme RM, DeGroot J, Wobbes T, Hendriks T. Tissue levels of active matrix metalloproteinase-2 and 9
in colorectal cancer. Br J Cancer 2002;86:1876-1883
, 百拇医药
4 Wang ZN, Xu HM. Relationship between collagen IV expression and biological behavior of gastric cancer.
World J Gastroenterol 2000;6:438-439
5 He YD, Zhao YW, Kong LF, Yin PZ. Activity alternating of matrix metalloproteinase-2 in hepatocellular carcinoma.
Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2000;8:925-953
6 Zhu ZY, Du Z, Wang YJ, Zhang W, Sun BC. Examination of Ecadherin and matrix metalloproteinase and its significance
, http://www.100md.com
in primary HCC. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2001;9:839-840
7 Coussens LM, Fingleton B, Matrisian LM. Matrix metalloproteinase inhibitors and cancer:trials and tribulations.
Science 2002;295:2387-2392
8 Egeblad M, Werb Z. New functions for the matrix metalloproteinases in cancer progression. Nat Rev Cancer
2002;2:161-174
, 百拇医药 9 Stracke JO, Hutton M, Stewar M, Pendas AM, Smith B, Lopezotin C, Murophy G, Knauper V. Biochemical characterization
of the catalytic domain of human matrix metalloproteinase 19. Evidence for a role as a potent basement membrane
degrading enzyme. J Biol Chem 2000;275:14809-14816
10 Uria JA, Lopez-Otin C. Matrilysin-2, a new matrix metallopro-teinase expressed in human tumors and showing the
, 百拇医药
minimal domain organization required for secretion, latency, and activity. Cancer Res 2000;60:4745-4751
11 Stock UA, Wiederschain D, Kilroy SM, Shum-Tim D, Khalil PN, Vacanti JP, Mayer Jr JE, Moses MA. Dynamics of
extracellular matrix production and turnover in tissue engineered cardiovascular structures. J Cell Biochem
2001;81:220-228
12 Lauer-Fields JL, Tuzinski KA, Shimokawa K, Nagase H, Fields GB. Hydrolysis of triple-helical collagen peptide models
, 百拇医药
by matrix metalloproteinasea. J Biol Chem 2000;275:13282-13290
13 Fan YJ, Han MZ. The relation of matrix metalloproteinase and digestive tumor. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi
2004;12:2174-2176
14 Kleiner DE, Stetler-Stevenson WG. Matrix metalloproteinases and metastasis. Cancer Chemother Pharmacol
1999;43(Suppl):S42-51
15 Ji F, Wang WL, Yang ZL, Li YM, Huang HD, Chen WD. Study on the expression of matrix metalloproteinase-2 mRNA
, 百拇医药
in human gastric cancer. World J Gastroenterol 1999;5:455-457
16 Jiang ZS, Gao Y, Biological feature of matrix metalloproteinase and its action in metastasis of liver cancer.
Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2000;8:1403-1404
17 Ellenrieder V, Alber B, Lacher U, Hendler SF, Menke A, BoeckW, Wagner M, Wilda M, Friess H, Buchler M, Adler G,Gress TM. Role of MT-MMPs and MMP-2 in pancreatic cancer progression. Int J Cancer 2000;85:14-20
, 百拇医药
18 Filie JD, Buckler CE, Kozak CA. Genetic mapping of the mouse ferritin light chain gene and 11 pseudogenes on 11
mouse chromosomes. Mamm Genome 1998;9:111-113
19 Juan SH, Aust SD. The effect of putative nuclestion sites on the loading and stability of iron in ferritin.
Arch Biochem Biophys 1998;350:259-265
20 Powell AK. Ferritin. Its mineralization. Met Ions Biol Syst 1998;35:515-561
编辑 张海宁, http://www.100md.com( 韩明子,范玉晶, 王双双)
