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编号:10618787
RFDD-PCR技术用于构建证的相关基因表达谱初探———支气管哮喘肾虚证患者外周血mRNA差异显示研究
http://www.100md.com 《中华中西医杂志》 2003年第22期
RFDD-PCR技,RFDD-PCR,基因表达谱,肾虚证,支气管哮喘,差异显示
     【摘要】 目的 运用RFDD-PCR技术初步筛选支气管哮喘肾虚证的相关基因,以冀探讨构建中医证的相关基因表达谱的研究方法。方法 采用限制性酶切片段差异显示技术(RFDD-PCR)。收集支气管哮喘肾虚证患者治疗前后外周血,分离纯化其总RNA、合成双链cDNA、TaqI限切酶酶切、在酶切位点两端连上接头、用特异配对于接头的引物进行降落PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染、回收差异条带并重扩增、反向斑点杂交、测序、生物信息学分析。结果 共找到36条差异条带,其中25条能用斑点杂交验证,选取共性差异条带3条进行测序,结果与基因库比较未发现同源序列。结论 3条基因片段可能是与支气管哮喘肾虚证相关的新基因;RFDD-PCR技术为研究与中医证相关的基因差异表达谱提供了一种可行的方法。

    关键词 RFDD-PCR 基因表达谱 肾虚证 支气管哮喘 差异显示

    The initial exploration of application of RFDD-PCR

    for constructing related genes’expression profiles of syndromes

    ———The differential display study in peripheral blood of patients with asthma and kidney vacuity

    Hu Yueshan,Li Jiefen,Tan Yuhui,et al.

    Biochemistry Institute of Guangzhou University of TCM ......

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