新型人白细胞介素-13在大肠杆菌中的表达及生物活性分析

http://www.100md.com 王大东 李基业 王金惠 徐东刚2 , 焦华波 李涛 邓群 王嘉玺 黎沾良

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     王大东；李基业；王金惠；徐东刚；焦华波；李涛；邓群；王嘉玺；黎沾良 军事医学科学院基础医学研究所 北京100850；解放军第304医院普通外科 北京100037 细胞与分子免疫学杂志 2003 4

    关键词：新型人白细胞介素-13；克隆；原核表达

    目的:在大肠杆菌中表达人白细胞介素13的新型拼接体蛋白。方法:用植物凝集素(PHA)和刀豆凝集素(ConA)共刺激人Jurkat细胞,通过半巢式RT PCR扩增在98位缺失Gln、不含信号肽的人IL 13新拼接体基因,并克隆入pBV2 2 0 ,构建pBVIL 13表达载体,经温度诱导后在大肠杆菌DH5α中表达新型人IL 13蛋白。表达产物经S 2 0 0纯化、复性后,用TF 1细胞进行MTT比色测定其活性。结果:成功地分离了人IL 13新拼接体基因,并在大肠杆菌中表达。分离纯化的新型IL 13蛋白,其比活性为1.6×10 6U/mg。结论:获得具有生物学活性的新型人IL 13细胞因子,为用其治疗肿瘤和脓毒症提供了...

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