OPG与MBP融合蛋白在大肠杆菌中的表达

http://www.100md.com 刘继中 纪宗玲 陈苏民 胡蕴玉 李毅 张晓楠

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     刘继中；纪宗玲；陈苏民；胡蕴玉；李毅；张晓楠 第四军医大学西京医院全军骨科研究所；第四军医大学生物化学与分子生物学教研室 生物化学与分子生物学教研室 陕西西安710032 细胞与分子免疫学杂志 2002 6

    关键词：骨保护素；克隆；大肠杆菌；表达

    目的 克隆人骨保护素 (OPG)成熟肽段编码区基因 ,并在大肠杆菌中表达。方法 采用RT PCR法 ,扩增人OPG成熟肽段编码区cDNA ,并克隆入原核表达载体pMAL c2x中 ,转化BL2 1(DE3)PlysS大肠杆菌感受态细胞。经 0 .1mmol/LIPTG诱导后 ,收集菌体蛋白 ,进行SDS PAGE及Westernblot鉴定。结果 获得人OPG成熟肽段编码区cDNA ,以构建的原核表达载体pMAL OPG转化菌株后 ,可表达人OPG和麦芽糖结合蛋白 (MBP)的融合蛋白 ,相对分子质量 (Mr)为 85 0 0 0。表达产物的蛋白量约为菌体总蛋白的 13%。Westernblot表明 ,融合蛋白...

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