胃癌下调新基因CA11表达产物的组织分布和细胞定位

http://www.100md.com 杜建军 窦科峰 王兆太 胡沛臻 王为忠 高志清

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     杜建军；窦科峰；王兆太；胡沛臻；王为忠；高志清 山东武警医院普通外科；第四军医大学病理教研室；第四军医大学西京医院普通外科 陕西西安710032 细胞与分子免疫学杂志 2002 3

    关键词：胃癌；CA11；组织分布；定位

    目的 筛选胃癌下调基因 ,确定其表达产物的组织分布和细胞定位。方法 从已成功建立的 5人份正常胃粘膜mRNA(Tester)抑制消减杂交胃癌mRNA(Driver)的差异表达文库 ,随机挑取阳性克隆测序为CA11,RT -PCR证实其为下调基因。地高辛标记CA11原位mRNA杂交。在其它组织器官中扩增此基因 ,以表明其组织分布特异性。CA11克隆至载体 pcDNA3.1/Myc -His(- )A中 ,并瞬时转染CA11的COS - 7细胞。生长至对数生长期时 ,吸取培养液 ,Talon吸附、洗脱后 ,取洗脱液进行SDS蛋白电泳及Westernblot。CA11转染COS - 7细胞后加抗Myc标签的一抗 ,最后加FITC标记的二抗在荧光显...

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