血站实验室质量保证的简评
输血医学是医学的重要组成部分，输血作为一种特殊的医疗手段，它保证了临床诸多先进的医疗技术得以安全实施，挽救了无数生命，在国内外领域里发挥着不可替代的作用。随着近几年来临床医学、毒学、免疫遗传学、分子生物学和现代医学管理学等学科的发展，输血不仅仅是一种临床治疗辅助手段，而且已经发展成为一门独立的边缘学科—输血学。临床输血学是研究血液及血液成分如何安全有效地治疗相关的疾病、防治输血不良反及输血可能传播疾病的一门分支学科。它涉及到血液学、免疫学、传播病学、临床移植医学、流行病学、微生物学、病毒学等相关学科的基础知识和血液的采集、成分的制备、血液的检测、质量控制等与血液质量有关的法律问题。就此通过卫生部室间质评结果漏检问题的几点总结如下。
1 要有良好的加样规范
为了保证血液的质量，德国标准实验室装置与设备标准委员会1996-07第4版规定了加样误差范围，见表1。我站为确保血液质量，首先从检验标本抓起，严格按照1/10的比例加防凝剂，100μl的抗凝集，加1ml的血混匀即可。防凝集不要加过多或过少，过多会将血液稀释，过少防凝效果不好，影响结果的准确性。以HCV抗体检测为例，科华、丽珠或新创的试剂盒都是加标本稀释液100μl、加待检标本10μl，如果加防凝集过量的话，标本将被稀释，再加上ML/AT加样针的内径比较大，吸取标本时接触面积大，加到微板上标本的体积少于10μl，就有可能超出允许误差范围，造成漏检。因此，严格按照比例加防凝剂是十分重要的。在加样过程中，要仔细观察是否有漏加现象，等待加完标本后，要观察酶标板，看标本稀释液是否有没变色的，如果有没变色的，须用手工重加1次样本，严防漏加、漏检，造成严重后果。
表1 加样的最大允许误差 (略)
2 试剂的选择
选择优良的试剂，由于科学技术的迅速发展，近十几年来各检测试剂更新换代快，如HIV-抗体检测试剂由第1代发展到第3代，其检测窗口期则从45天降到22天。如检测HIV-1P 24 抗原和HIVNA，其窗口期还可以缩短到平均16天和11天左右。抗HCV试剂也由第1代发展到第3代，其窗口期已由3～5个月缩短到平均70天。HBV暴露后HBsAg或HBV/DNA检测的窗口期为2～6周，HBV/DNA(NAT)比HBsAg早5～10天测出。所以在进行检测时尽可能选取灵敏而特异的试剂。如表2。
表2 3代HIV抗体ELISA试剂的窗口期(略)第1代 间接法 IgG HIV-1 6～8周(45天) 第2代 间接法 IgG HIV-1/2 4～5周(32天) 第3代 双抗原夹心法IgG，IgM HIV-1/2 约3周(22天) 因此选择试剂时，必须以酶标板为载体，高灵敏度、高特异性、稳定和无放射性污染的ELISA方法进行检测。以防漏检造成不良后果。试剂的储存，为保证试剂在有效期 内使用，必须严格控制温度在2～6℃之间，否则，即使在有 效期之内，试剂可能已经失效，即使做了化验也是无效的。因此必须每天观察温度2次以上。并且每批试剂必须经过质检合格后才能使用。
3 对试剂盒的要求
由于从献血者采集的血液要制备成各种血液制品应用于临床，因此必须对献血者严格筛检以确保血液质量和输血安全。现世界各国对输血相关疾病检测用的试剂均有严格要求。我国规定对献血者检测HBsAg、HCV抗体、HIV抗体和梅毒的试剂盒必须经中国药品生物制品检定所批批检定合格才能进入市场。一般对这些试剂盒的要求如下:(1)必须标明品名、商标名、规格、生产单位、地址、电话及邮编。(2)必须写明生产批号、生产日期、有效期、储存温度和写明是体外诊断试剂。(3)必须贴有国家认可的药检部门的检定合格封签。(4)试剂盒内各种组分齐全和足量，并附使用说明书。(5)ELISA试剂盒所配96孔微量板必须符合标准，以便适合自动洗板机和自动酶标仪。
4 质控品的选择
为确保血液质量，在检验过程中，每项实验必须做室内质控，要求每次质控血清测定的S/CO值在2S之内，如果质控血清的S/CO值出现以下情况即为失控:(1)1次超过3S;(2)连续2次超出2S;(3)连续5次处于一侧2S内。试验无效，必须查找失控原因。可能的原因有:实际后或对照失效，仪器、加样器的改变，使用新一批试剂盒，温育的温度改变等。血液质控品，HBV、HCV、HIV由上海血液中心提供，TP质控品由试剂盒内阳性对照以1/3稀释得来。
5 仪器的选择
选择合适的仪器设备，根据标本量的要求精确度和使用性来选择仪器设备，全自动加样器选择，加样方法的采纳及全自动酶免分析系统，自动加试剂、自动洗板、自动判读结果，形成一套质量保证体系。以免造成人为的差错事故，出现错报、漏报。把不合格的血发出，造成不可想象的后果。
6 人员技术的培训问题
对于检验人员来讲，在上岗之前必须进行上岗前的培训，培训合格者，发给上岗证。培训不合格者，不得从事血站实验室的检验工作。因为，在检验过程中出现的一切问题往往是工作人员操作不熟练造成的;培训的真正价值是使检验人员在今后的工作中，能够熟练操作，提高血液质量和工作效率。
7 总结
以上6条，是我们在10年工作中的经验总结。我们认为大力加强献血者血液标本的初复检工作，严防漏检、漏项，强化检验质量，不放过弱阳性标本是非常重要的;尤其是艾滋病高发区的血站更应该加强防范，严把体检和血液检测质量关，严格核对制度，初、复检试剂要选择符合卫生部标准的不同厂家试剂，将输血传染病的传播控制到最低限度，提高临床输血安全性。
参考文献
1 王培华.输血技术学，第2版.北京:人民卫生出版社，2002，89.
(收稿日期:2003-12-21) (编辑一 坤)
作者单位:252000山东省聊城市中心血站, http://www.100md.com(张桂英)
1 要有良好的加样规范
为了保证血液的质量，德国标准实验室装置与设备标准委员会1996-07第4版规定了加样误差范围，见表1。我站为确保血液质量，首先从检验标本抓起，严格按照1/10的比例加防凝剂，100μl的抗凝集，加1ml的血混匀即可。防凝集不要加过多或过少，过多会将血液稀释，过少防凝效果不好，影响结果的准确性。以HCV抗体检测为例，科华、丽珠或新创的试剂盒都是加标本稀释液100μl、加待检标本10μl，如果加防凝集过量的话，标本将被稀释，再加上ML/AT加样针的内径比较大，吸取标本时接触面积大，加到微板上标本的体积少于10μl，就有可能超出允许误差范围，造成漏检。因此，严格按照比例加防凝剂是十分重要的。在加样过程中，要仔细观察是否有漏加现象，等待加完标本后，要观察酶标板，看标本稀释液是否有没变色的，如果有没变色的，须用手工重加1次样本，严防漏加、漏检，造成严重后果。
表1 加样的最大允许误差 (略)
2 试剂的选择
选择优良的试剂，由于科学技术的迅速发展，近十几年来各检测试剂更新换代快，如HIV-抗体检测试剂由第1代发展到第3代，其检测窗口期则从45天降到22天。如检测HIV-1P 24 抗原和HIVNA，其窗口期还可以缩短到平均16天和11天左右。抗HCV试剂也由第1代发展到第3代，其窗口期已由3～5个月缩短到平均70天。HBV暴露后HBsAg或HBV/DNA检测的窗口期为2～6周，HBV/DNA(NAT)比HBsAg早5～10天测出。所以在进行检测时尽可能选取灵敏而特异的试剂。如表2。
表2 3代HIV抗体ELISA试剂的窗口期(略)第1代 间接法 IgG HIV-1 6～8周(45天) 第2代 间接法 IgG HIV-1/2 4～5周(32天) 第3代 双抗原夹心法IgG，IgM HIV-1/2 约3周(22天) 因此选择试剂时，必须以酶标板为载体，高灵敏度、高特异性、稳定和无放射性污染的ELISA方法进行检测。以防漏检造成不良后果。试剂的储存，为保证试剂在有效期 内使用，必须严格控制温度在2～6℃之间，否则，即使在有 效期之内，试剂可能已经失效，即使做了化验也是无效的。因此必须每天观察温度2次以上。并且每批试剂必须经过质检合格后才能使用。
3 对试剂盒的要求
由于从献血者采集的血液要制备成各种血液制品应用于临床，因此必须对献血者严格筛检以确保血液质量和输血安全。现世界各国对输血相关疾病检测用的试剂均有严格要求。我国规定对献血者检测HBsAg、HCV抗体、HIV抗体和梅毒的试剂盒必须经中国药品生物制品检定所批批检定合格才能进入市场。一般对这些试剂盒的要求如下:(1)必须标明品名、商标名、规格、生产单位、地址、电话及邮编。(2)必须写明生产批号、生产日期、有效期、储存温度和写明是体外诊断试剂。(3)必须贴有国家认可的药检部门的检定合格封签。(4)试剂盒内各种组分齐全和足量，并附使用说明书。(5)ELISA试剂盒所配96孔微量板必须符合标准，以便适合自动洗板机和自动酶标仪。
4 质控品的选择
为确保血液质量，在检验过程中，每项实验必须做室内质控，要求每次质控血清测定的S/CO值在2S之内，如果质控血清的S/CO值出现以下情况即为失控:(1)1次超过3S;(2)连续2次超出2S;(3)连续5次处于一侧2S内。试验无效，必须查找失控原因。可能的原因有:实际后或对照失效，仪器、加样器的改变，使用新一批试剂盒，温育的温度改变等。血液质控品，HBV、HCV、HIV由上海血液中心提供，TP质控品由试剂盒内阳性对照以1/3稀释得来。
5 仪器的选择
选择合适的仪器设备，根据标本量的要求精确度和使用性来选择仪器设备，全自动加样器选择，加样方法的采纳及全自动酶免分析系统，自动加试剂、自动洗板、自动判读结果，形成一套质量保证体系。以免造成人为的差错事故，出现错报、漏报。把不合格的血发出，造成不可想象的后果。
6 人员技术的培训问题
对于检验人员来讲，在上岗之前必须进行上岗前的培训，培训合格者，发给上岗证。培训不合格者，不得从事血站实验室的检验工作。因为，在检验过程中出现的一切问题往往是工作人员操作不熟练造成的;培训的真正价值是使检验人员在今后的工作中，能够熟练操作，提高血液质量和工作效率。
7 总结
以上6条，是我们在10年工作中的经验总结。我们认为大力加强献血者血液标本的初复检工作，严防漏检、漏项，强化检验质量，不放过弱阳性标本是非常重要的;尤其是艾滋病高发区的血站更应该加强防范，严把体检和血液检测质量关，严格核对制度，初、复检试剂要选择符合卫生部标准的不同厂家试剂，将输血传染病的传播控制到最低限度，提高临床输血安全性。
参考文献
1 王培华.输血技术学，第2版.北京:人民卫生出版社，2002，89.
(收稿日期:2003-12-21) (编辑一 坤)
作者单位:252000山东省聊城市中心血站, http://www.100md.com(张桂英)