【摘要】 目的 分析类风湿关节炎(RA)患者外周血中Th1/Th2细胞亚群的变化及其在疾病中的作用。方法 采用细胞内细胞因子免疫荧光染色和流式细胞术，在单细胞水平上检测RA患者的外周血中Th1，Th2的分布及其平衡情况。结果 RA患者PBMC中的IFN-γ + 细胞和IFN-γ + /IL-4 + 细胞百分率高于正常人(P<0.05)，而IL-4 + 细胞百分率与正常人差异无显著性。活动期RA患者PBMC中的IFN-γ + 和IFN-γ + /IL-4 + 细胞百分率明显高于非活动期RA患者(P<0.05)，而IL-4 + 细胞百分率明显低于RA患者非活动期(P<0.05)。结论 RA患者PBMC中Th1细胞及Th1/Th2细胞的比值显著升高并占优势(P<0.05)，并与疾病的活动程度有关。Th1/Th2细胞的平衡在RA的发病机制及疾病进展中可能具有重要作用。

    关键词 类风湿 PBMC Th1/Th2细胞 IFM-γ + /IL-4 + 细胞百分率 流式细胞仪

    1 材料与方法

    1.1 标本 随机选择RA患者22例，RA诊断根据1987年美国风湿病学会(ACR)修订标准 [3] ，其中活动期13例，非活动期9例;病程1个月～10年，另设健康对照20例为对照组，分别取RA患者和正常人静脉血10ml。

    1.2 PBMC的分离和培养 用淋巴细胞分离液按密度梯度离心法分离和培养PBMC，含10%胎牛血清的RPMI1640培养液重悬PBMC，调细胞浓度为10 6 /ml，在24孔培养板内每孔加1ml细胞悬液 ......