老年大鼠胃大部切除围手术期纤溶功能变化的实验研究
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李玉峰 王士雯 高雪 殷宗建 余松涛 高国杰
关键词：大鼠；胃大部切除术；血浆组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activation， t-PA)；(plasminogen activation inhibitor type-1，PAI-1)
1999年3～6月通过检测老年及成年大鼠胃大部切除术前后血浆组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activation， t-PA)及其抑制物(plasminogen activation inhibitor type-1，PAI-1)的活性及其动态变化，探讨腹部手术对老年大鼠血液纤溶功能的影响。
一、材料与方法
1.大鼠分组及胃大部切除模型的建立：SD(二级)大鼠由解放军总医院动物中心提供，成年(10月龄)组及老年(24月龄)组各12只，成年及老年大鼠体重分别为(230±23)g及(435±35)g。术前24 h禁食，以塞胺酮10～15 mg/kg肌肉注射麻醉,上腹部正中切口，暴露胃体，分离并结扎胃短动脉、胃网膜左、右动脉，沿胃大弯切除2/3的胃体，模拟Billroth Ⅰ式胃十二指肠吻合术。
2.标本采集及测定：术前1 d及术后6、12、24、48及72 h分别自眼眶静脉取血1.0～1.5 ml，与0.13 mmol/L的枸橼酸钠按体积比9∶1混合抗凝，4℃，2 500 r/min，离心10 min，取上清血浆送检。血浆t-PA及PAI-1应用酶联免疫法(ELISA)测定。试剂由美国BOLPOOL公司提供。活性型t-PA=〔t-PA/(t-PA+PAI-1)〕×100%。
3.统计学处理：数据以均数±标准差(X±s)表示，两样本均数比较用t检验。
二、结果
老年组及成年组大鼠胃大部切除术前后血浆t-PA、PAI-1测定结果见表1。
三、讨论
血浆中的t-PA及PAI-1活性是全血总纤溶活性的主要决定因素。PAI-1通过与t-PA、尿激酶型纤溶酶原激活剂(u-PA)结合成不可逆的复合物而使t-PA、u-PA失去活性，PAI-1活性增加与心血管疾病的严重程度密切相关〔1〕。本实验显示，老年大鼠血浆t-PA活性降低，PAI-1活性增高，活性型t-PA的比例下降，总纤溶活性降低，表明老年大鼠血液纤溶功能减退，是易出现血栓前状态及易患血栓性疾病的原因之一。成年大鼠术后6～12 h血浆t-PA活性增高，伴术后6 h PAI-1活性降低，活性型t-PA比例增加，术后早期出现的一过性纤溶功能增强可能是机体对术后全身凝血机制增强的一种代偿反应，提示成年动物纤溶功能的调节能力较强，老年大鼠术后6 h仅出现t-PA的一过性增高，但于术后24～48 h之间较术前明显下降，术后24 h PAI-1活性明显升高，活性型t-PA比例下降，总纤溶活性显著降低。老年大鼠术后24～48 h出现一明显的纤溶功能下降阶段，可能是术后高凝状态形成的原因之一。术后短期内出现纤溶活性增高可能与手术刺激及(或)由于术中出血导致凝血、止血机制增强而不同程度地激活纤溶功能有关。人类及动物如家禽、 大鼠等随着年龄的增长， 其纤溶功能下降，表现为t-PA活性下降及PAI活性增强〔2〕。老年大鼠于术后出现t-PA活性下降，可能是对术后早期代偿性纤溶增强的一种反应，表明老年动物纤溶系统的调节功能下降，在一系列应激状态下，引起t-PA的能力降低或耗竭，导致t-PA产生减少。老年大鼠术后24～48 h出现血浆PAI-1活性明显增强的机制尚有待进一步探讨，可能与手术应激、缺氧、各种细胞因子(如肿瘤坏死因子、白介素-1、内毒素等)刺激使PAI-1释放增加，或与调整PAI-1分泌的某些因素的功能失调有关〔3〕，提示对临床上需要手术的老年患者，尤其是患有冠心病等有血栓形成倾向的疾病时，应注意术后高凝状态的发生，如无禁忌证，在检测有关凝血及纤溶指标的同时慎重应用抗栓治疗，对预防各种血栓性疾病的发生可能是有利的。
表1 老年组及成年组大鼠胃大部切除术前及术后各时点血浆纤溶活性的变化(X±s)
组别 大鼠只数 术前 术后(h)
6 12 27 48 72
t-PA(IU/ml)
成年组 12 3.20±0.36 4.00±0.64** 3.85±0.37* 3.00±0.43 3.13±0.32 2.98±0.38
老年组 12 2.13±0.23△ 2.65±0.32*△△ 2.32±0.36△△ 1.23±0.16**△△ 1.65±0.36*△△ 1.86±0.35△△
PAI-1(IU/ml)
成年组 12 3.63±0.63 2.86±0.36* 3.63±0.45 3.86±0.54 3.68±0.35 3.76±0.47
老年组 12 4.96±0.47△ 4.63±0.32△ 4.86±0.37△ 5.87±0.36**△△ 5.32±0.45*△ 5.10±0.23△
活性型t-PA(%)
成年组 12 46.8±11.2 58.3±12.1* 51.5±9.4 43.7±10.5 45.9±8.3 44.2±10.5
老年组 12 29.6±6.4△△ 36.4±8.3*△△ 32.3±6.3△△ 17.3±3.3**△△ 23.6±5.4*△△ 26.7±7.2△△
t-PA/PAI-1
成年组 12 0.88±0.06 1.41±0.21** 1.06±0.16* 0.76±0.07 0.85±0.12 0.79±0.05
老年组 12 0.43±0.03△ 0.75±0.13*△ 0.48±0.08△ 0.21±0.03**△△ 0.31±0.03*△△ 0.36±0.04△
注：与同年龄组术前相比，*P<0.05，**P<0.01；组间各时点比较，△P<0.05，△△P<0.01
基金项目：全军“九五”医学科研规划重点课题
作者单位：李玉峰(100853北京市，解放军总医院老年心血管病研究所)
王士雯(100853北京市，解放军总医院老年心血管病研究所)
高雪(100853北京市，解放军总医院老年心血管病研究所)
余松涛(100853北京市，解放军总医院老年心血管病研究所)
高国杰(100853北京市，解放军总医院老年心血管病研究所)
殷宗建(100853北京市，解放军总医院老年心血管病临床检验科)
参考文献
1，Selma S.Plasma LP and t-PA-PAI-1 complex levels in coronary heart disease.Thromb Res，1996,83：77-85.
2，朱广瑾.纤维蛋白溶解及调节新概念.见：汪钟，主编.现代血栓病学.第1版.北京：北京医科大学 协和医科大学联合出版社，1996.144-145.
3，Yoshizumi M，Tsaji H，Nish H，et al.ANP inhibits the expression of tissue factor and PAI-1induced by angiotension Ⅱ incultured rat aortic endothelial cells.Thromb Haemost，1998，79：631-634