丁咯地尔对大鼠外周离体血管的药理作用
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中国新药与临床杂志
[摘要] 目的：分析丁咯地尔对大鼠外周血管的药理作用及机制。方法：采用离体血管平滑肌张力实验，研究其对多种因素引起大鼠尾动脉、胸主动脉收缩作用的影响。结果：丁咯地尔可浓度依赖性地使去甲肾上腺素、去氧肾上腺素、可乐定和5-羟色胺引起的大鼠尾动脉收缩的累积对数浓度-反应曲线平行右移，最大反应不降低，其pA2分别为5.45,7.25,5.97和6.58。使去甲肾上腺素致大鼠胸主动脉；氯化钾、氯化钙致大鼠尾动脉、胸主动脉收缩的累积对数浓度-反应曲线右移，最大反应降低，其pD′ 2分别为3.88,3.76,3.33,4.03和3.60。结论：丁咯地尔可竞争性拮抗大鼠尾动脉的肾上腺素α受体(α1，α2受体)和5-羟色胺受体，还可非竞争性拮抗氯化钾、氯化钙致大鼠尾动脉、胸主动脉的收缩。
丁咯地尔(buflomedil)在国外已广泛用于治疗外周血管及脑血管性疾病，能明显改善病人的症状。目前认为丁咯地尔通过多种复杂药理机制而发挥作用。包括非选择性阻滞肾上腺素α受体、钙通道阻滞作用、抗血小板聚集、提高红细胞变形能力、降低血液粘滞性、降低组织氧耗等，从而提高外周、中枢血管的营养血流[1-5]。
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现有的资料多是关于丁咯地尔临床效果的评价[2，3，6，7]，对丁咯地尔作用机制的研究国外多是在狗、兔上进行的，至于该药对大鼠血管的作用还未见报道。本实验研究了丁咯地尔对去甲肾上腺素(norepinephrine)，去氧肾上腺素(phenylephrine)、可乐定(clonidine)、5-羟色胺(serotonine)、氯化钾和氯化钙引起的大鼠尾动脉、胸主动脉收缩作用的影响，从而分析丁咯地尔对大鼠外周血管的药理作用及作用机制。
材料与方法
材料 SD大鼠36只，体重260 g±s 45 g。所用药物为：丁咯地尔，批号是0/002/4，由意大利Biomedica Foscama公司赠送；重酒石酸去甲肾上腺素，上海禾丰制药有限公司生产；盐酸去氧肾上腺素，上海天丰药厂生产；盐酸可乐定，Sigma公司产品；5-羟色胺，瑞士进口分装。
方法 将大鼠断头处死后，迅速剖胸取出胸主动脉和尾动脉，置于充有95%O2+5%CO2混合气体的krebs溶液中，剪成3～4 mm长的血管环，穿入2根总直径小于血管口径的不锈钢丝，2端分别连在张力换能器和浴槽底部的钩上，静止张力分别为2 g，1.5 g。血管环在静止张力下稳定1.5～3 h后，用累积浓度给药方法，分别作出加入阻断剂前后激动剂的累积对数浓度-反应曲线(logarithm cumulative concentration response curve, LCCRC),其中氯化钙量效曲线的做法按文献[8]进行。将不同浓度药物产生的收缩反应换算成在同一标本上产生的最大收缩幅度的百分数。
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结果
丁咯地尔对血管环基础张力的影响 丁咯地尔(1 μmol·L-1，5 mmol·L-1)单独使用，对大鼠尾动脉、胸主动脉血管环基础张力无明显影响。
丁咯地尔对大鼠尾动脉收缩的抑制作用 丁咯地尔(1 μmol·L-1，100 μmol·L-1)可浓度依赖性地使去甲肾上腺素、去氧肾上腺素、可乐定和5-羟色胺致大鼠尾动脉收缩的LCCRC平行右移，最大反应不降低(图1～4)，丁咯地尔对去甲肾上腺素、去氧肾上腺素、可乐定和5-羟色胺拮抗作用的pA2值分别为5.45，7.25, 5.97和6.58(血管标本为大鼠尾动脉)，主要表现为竞争性拮抗作用。丁咯地尔(10 μmol·L-1，100 μmol·L-1)使氯化钾和氯化钙致大鼠尾动脉收缩的LCCRC右移，最大反应降低(图5，6)，其对氯化钾、氯化钙拮抗作用的pD′ 2值在大鼠尾动脉分别为3.76和4.03，主要表现为呈非竞争性拮抗作用。丁咯地尔对大鼠胸主动脉收缩的抑制作用 丁洛地尔(10 μmol·L-1，500 μmol·L-1)对去甲肾上腺素、氯化钾和氯化钙所致的大鼠胸主动脉收缩均产生非竞争性拮抗作用(图7，8，9)其对去甲肾上腺素、氯化钾和氯化钙拮抗作用的pD′ 2值在大鼠胸主动脉分别为3.88，3.33和3.60。
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图1 丁洛地尔在大鼠尾动脉上对去甲肾上腺素作用的影响
图2 丁咯地尔在大鼠尾动脉上对去氧肾上腺素作用的影响
图3 丁咯地尔在大鼠尾动脉上对可乐定作用的影响
图4 丁洛地尔在大鼠尾动脉上对5-羟色胺作用的影响
图5 丁洛地尔在大鼠尾动脉上对氯化钾作用的影响
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图6 丁咯地尔在大鼠尾动脉上对氯化钙作用的影响
图7 丁洛地尔在大鼠胸主动脉上对去甲肾上腺素作用的影响
图8 丁咯地尔在大鼠胸主动脉上对氯化钾作用的影响
图9 丁洛地尔在大鼠胸主动脉上对氯化钙作用的影响
讨论
从丁咯地尔对大鼠尾动脉上去甲肾上腺素、去氧肾上腺素、可乐定和5-羟色胺作用的pA2大小来看，丁咯地尔对大鼠尾动脉平滑肌上不同受体的竞争性拮抗作用强度依次为肾上腺素α1受体、5-HT受体和肾上腺素α2受体。
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一般认为，血管平滑肌细胞膜上对药物敏感的Ca2+通道至少有2种：电压依赖性Ca2+通道(potential dependent Ca2+ channel, PDC)和受体控制性Ca2+通道(receptor operated Ca2+ channel, ROC)[8，9]。在大鼠尾动脉、胸主动脉上，实验结果提示丁咯地尔与外钙离子非竞争性作用于PDC，抑制外钙内流。从丁咯地尔对氯化钾、氯化钙拮抗作用的pD′ 2大小来看，在大鼠较小的阻力血管(尾动脉)和较大的传导血管(胸主动脉)上，丁咯地尔对两者的PDC阻滞作用强度相近。丁咯地尔对大鼠不同部位血管由去甲肾上腺素引起的收缩具有不同的影响：即对尾动脉收缩表现为竞争性拮抗作用；而对胸主动脉收缩则表现为非竞争性拮抗作用。提示丁咯地尔对大鼠胸主动脉上的ROC也有抑制作用，它不仅抑制外Ca2+经ROC内流，也能抑制内Ca2+释放。
以上结果提示在大鼠尾动脉及胸主动脉上，丁咯地尔是通过肾上腺素α受体、5-羟色胺受体及Ca2+而发挥作用的。
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[参考文献]([REFERENCES])
[1] Clissold SP, Lynch S, Sorkin EM. Buflomedil. A review of its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties, and therapeutic efficacy in peripheral and cerebral vascular diseases[J]. Drugs, 1987, 33:430-460.
[2] Spitzer S, Bach R, Schieffer H. Walk training and drug treatment in patients with peripheral arterial occlusive disease stage Ⅱ. A review[J]. Int angiol, 1992, 11:204-210.
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[3] Kobayashi S, Yamaguchi S, Okada K, et al. Effect of long-term administration of buflomedil on regional cerebral blood flow in chronic cerebral infarction[J]. Angiology, 1988, 39:934-941.
[4] Kushiku K, Ohba M, Mikagi T, Nuki S, Araki Y, Furukawa T. Cardiovascular actions of buflomedil and possible mechanisms involved[J]. Arzneimittelforschung, 1989, 39:670-677.
[5] Toda N, Okunishi H, Okamura T, Mzyazaki M. Effects of buflomedil on isolated dog arteries[J]. Arch Int Pharmacodyn Ther, 1983, 266:117-130.
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[6] 卢 萍(Lu P)，穆庆霞(Mu QX)，狄 群(Di Q)，杨美南(Yang MN).丁咯地尔与脉络宁治疗脑梗死比较[J].中国新药与临床杂志(Chin J New Drugs Clin Rem), 1999, 18:149-150.
[7] 吴笃初(Wu DC)，吕传真(Lu CZ)，余慧贞(Yu HZ)，邵福沅(Shao FY)，汪 昕(Wang X).丁咯地尔治疗急性脑梗死的多中心研究[J].中国新药与临床杂志(Chin J New Drugs Clin Rem)， 1998，17：161-163.
[8] 李 乐(Li L)，庄斐尔(Zhuang FE)，赵更生(Zhao GS).蛇床子素对家兔主动脉条的钙拮抗作用[J].中国药理学通报(Chin Pharmacol Bull), 1992,3:227-230.
[9] 方达超(Fang DC).钙拮抗剂[A].见：陈 修(Chen X).心血管药理学.第1版[M].北京：人民卫生出版社，1989.170-173., http://www.100md.com
丁咯地尔(buflomedil)在国外已广泛用于治疗外周血管及脑血管性疾病，能明显改善病人的症状。目前认为丁咯地尔通过多种复杂药理机制而发挥作用。包括非选择性阻滞肾上腺素α受体、钙通道阻滞作用、抗血小板聚集、提高红细胞变形能力、降低血液粘滞性、降低组织氧耗等，从而提高外周、中枢血管的营养血流[1-5]。
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现有的资料多是关于丁咯地尔临床效果的评价[2，3，6，7]，对丁咯地尔作用机制的研究国外多是在狗、兔上进行的，至于该药对大鼠血管的作用还未见报道。本实验研究了丁咯地尔对去甲肾上腺素(norepinephrine)，去氧肾上腺素(phenylephrine)、可乐定(clonidine)、5-羟色胺(serotonine)、氯化钾和氯化钙引起的大鼠尾动脉、胸主动脉收缩作用的影响，从而分析丁咯地尔对大鼠外周血管的药理作用及作用机制。
材料与方法
材料 SD大鼠36只，体重260 g±s 45 g。所用药物为：丁咯地尔，批号是0/002/4，由意大利Biomedica Foscama公司赠送；重酒石酸去甲肾上腺素，上海禾丰制药有限公司生产；盐酸去氧肾上腺素，上海天丰药厂生产；盐酸可乐定，Sigma公司产品；5-羟色胺，瑞士进口分装。
方法 将大鼠断头处死后，迅速剖胸取出胸主动脉和尾动脉，置于充有95%O2+5%CO2混合气体的krebs溶液中，剪成3～4 mm长的血管环，穿入2根总直径小于血管口径的不锈钢丝，2端分别连在张力换能器和浴槽底部的钩上，静止张力分别为2 g，1.5 g。血管环在静止张力下稳定1.5～3 h后，用累积浓度给药方法，分别作出加入阻断剂前后激动剂的累积对数浓度-反应曲线(logarithm cumulative concentration response curve, LCCRC),其中氯化钙量效曲线的做法按文献[8]进行。将不同浓度药物产生的收缩反应换算成在同一标本上产生的最大收缩幅度的百分数。
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结果
丁咯地尔对血管环基础张力的影响 丁咯地尔(1 μmol·L-1，5 mmol·L-1)单独使用，对大鼠尾动脉、胸主动脉血管环基础张力无明显影响。
丁咯地尔对大鼠尾动脉收缩的抑制作用 丁咯地尔(1 μmol·L-1，100 μmol·L-1)可浓度依赖性地使去甲肾上腺素、去氧肾上腺素、可乐定和5-羟色胺致大鼠尾动脉收缩的LCCRC平行右移，最大反应不降低(图1～4)，丁咯地尔对去甲肾上腺素、去氧肾上腺素、可乐定和5-羟色胺拮抗作用的pA2值分别为5.45，7.25, 5.97和6.58(血管标本为大鼠尾动脉)，主要表现为竞争性拮抗作用。丁咯地尔(10 μmol·L-1，100 μmol·L-1)使氯化钾和氯化钙致大鼠尾动脉收缩的LCCRC右移，最大反应降低(图5，6)，其对氯化钾、氯化钙拮抗作用的pD′ 2值在大鼠尾动脉分别为3.76和4.03，主要表现为呈非竞争性拮抗作用。丁咯地尔对大鼠胸主动脉收缩的抑制作用 丁洛地尔(10 μmol·L-1，500 μmol·L-1)对去甲肾上腺素、氯化钾和氯化钙所致的大鼠胸主动脉收缩均产生非竞争性拮抗作用(图7，8，9)其对去甲肾上腺素、氯化钾和氯化钙拮抗作用的pD′ 2值在大鼠胸主动脉分别为3.88，3.33和3.60。
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图1 丁洛地尔在大鼠尾动脉上对去甲肾上腺素作用的影响
图2 丁咯地尔在大鼠尾动脉上对去氧肾上腺素作用的影响
图3 丁咯地尔在大鼠尾动脉上对可乐定作用的影响
图4 丁洛地尔在大鼠尾动脉上对5-羟色胺作用的影响
图5 丁洛地尔在大鼠尾动脉上对氯化钾作用的影响
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图6 丁咯地尔在大鼠尾动脉上对氯化钙作用的影响
图7 丁洛地尔在大鼠胸主动脉上对去甲肾上腺素作用的影响
图8 丁咯地尔在大鼠胸主动脉上对氯化钾作用的影响
图9 丁洛地尔在大鼠胸主动脉上对氯化钙作用的影响
讨论
从丁咯地尔对大鼠尾动脉上去甲肾上腺素、去氧肾上腺素、可乐定和5-羟色胺作用的pA2大小来看，丁咯地尔对大鼠尾动脉平滑肌上不同受体的竞争性拮抗作用强度依次为肾上腺素α1受体、5-HT受体和肾上腺素α2受体。
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一般认为，血管平滑肌细胞膜上对药物敏感的Ca2+通道至少有2种：电压依赖性Ca2+通道(potential dependent Ca2+ channel, PDC)和受体控制性Ca2+通道(receptor operated Ca2+ channel, ROC)[8，9]。在大鼠尾动脉、胸主动脉上，实验结果提示丁咯地尔与外钙离子非竞争性作用于PDC，抑制外钙内流。从丁咯地尔对氯化钾、氯化钙拮抗作用的pD′ 2大小来看，在大鼠较小的阻力血管(尾动脉)和较大的传导血管(胸主动脉)上，丁咯地尔对两者的PDC阻滞作用强度相近。丁咯地尔对大鼠不同部位血管由去甲肾上腺素引起的收缩具有不同的影响：即对尾动脉收缩表现为竞争性拮抗作用；而对胸主动脉收缩则表现为非竞争性拮抗作用。提示丁咯地尔对大鼠胸主动脉上的ROC也有抑制作用，它不仅抑制外Ca2+经ROC内流，也能抑制内Ca2+释放。
以上结果提示在大鼠尾动脉及胸主动脉上，丁咯地尔是通过肾上腺素α受体、5-羟色胺受体及Ca2+而发挥作用的。
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[6] 卢 萍(Lu P)，穆庆霞(Mu QX)，狄 群(Di Q)，杨美南(Yang MN).丁咯地尔与脉络宁治疗脑梗死比较[J].中国新药与临床杂志(Chin J New Drugs Clin Rem), 1999, 18:149-150.
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