补肾清热毒方可保护肾组织——靶点为Fas和FasL
本报福建讯 补肾清热毒方是临床治疗狼疮性肾炎(LN)的有效方剂。福建中医学院和福建省人民医院的研究人员日前通过观察该方对类似于人类LN的慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样小鼠模型的干预,发现该方具有与强的松类似的作用:通过上调Fas、FasL表达,促进凋亡不足的细胞凋亡,保护肾组织。5ti, http://www.100md.com
研究人员将实验小鼠随机分成4组:正常对照组、模型组、补肾清热毒方组、强的松组。除正常对照组采用正常小鼠外,其余各组均采用cGVHD狼疮样小鼠模型。两给药组分别按一定比例将补肾清热毒方药物(旱莲草、枸杞子、金银花、丹皮、益母草等)和强的松掺入到普通饲料中喂饲,正常对照组则进食等量普通饲料。两组均用药8周。采用原位末端标记法(TUNEL)染色观察肾组织细胞凋亡;免疫组化、蛋白印记和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测Fas、FasL基因转录及蛋白表达情况。5ti, http://www.100md.com
TUNEL检测结果表明,正常对照组无TUNEL阳性细胞,模型组阳性细胞较正常对照组明显增多,补肾清热毒方组、强的松组阳性细胞也明显增多,但与模型组不同,主要为小管上皮细胞、浸润的炎细胸以及少量系膜细胞。5ti, http://www.100md.com
免疫组化检测表明,各组Fas均有表达,但正常对照组仅有少量表达;补肾清热毒方组、强的松组与正常对照组比较,肾小球与肾间质Fas阳性细胞表达高;与模型组比较,两组肾间质Fas表达高,肾小球表达无显著性差异;补肾清热毒方组和强的松组之间Fas表达无显著性差异。两组Fas阳性细胞主要为肾小管间质细胞,而少有肾小球细胞,可以导致模型鼠治疗后肾小球细胞凋亡较少而肾小管间质细胞凋亡较多。可见,补肾清热毒方和强的松可以通过上调凋亡调控基因Fas的表达而促进增生的固有细胞和浸润的炎细胞凋亡。5ti, http://www.100md.com
蛋白印记检测表明,补肾清热毒方组和强的松组Fas、FasL表达较正常对照组多;与模型组比较,两基因表达也增高,但与免疫组化检测不同,Fas表达与模型组无显著性差异。这可能是由于蛋白印记检测的是肾组织的总蛋白,而免疫组化分别对肾小球和肾小管间质进行半定量分析所致。5ti, http://www.100md.com
RT-PCR结果显示,补肾清热毒方组和强的松组FasmRNA水平较正常对照组和模型组高,补肾清热毒方组和强的松组之间无显著性差异。提示补肾清热毒方和强的松均可通过促进Fas的基因转录而上调其蛋白表达水平。5ti, http://www.100md.com
至于FasL蛋白的表达,补肾清热毒方组和强的松组均较模型组增高,蛋白印记检测结果与免疫组化结果一致。说明补肾清热毒方和强的松有上调FasL的作用。补肾清热毒方组和强的松组FasLmRNA水平较正常对照组和模型组高,但补肾清热毒方组和强的松组比较无显著性差异。提示补肾清热毒方组和强的松组FasL表达的增多可能是FasLmRNA转录水平增高所致。5ti, http://www.100md.com
研究人员介绍,FasL与靶细胞的Fas结合,能启动靶细胞凋亡的信号转导,使之进入凋亡过程。LN的发生与Fas、FasL及细胞凋亡密切相关。本研究结果提示,补肾清热毒方与强的松作用相似,均可通过上调Fas、FasL的表达,使Fas和FasL结合,从而促进表达部位凋亡不足的细胞凋亡,发挥保护肾组织的结构和功能的作用。5ti, http://www.100md.com
(陈杨荣 任文英 江明)(陈杨荣;任文英;江明 )
研究人员将实验小鼠随机分成4组:正常对照组、模型组、补肾清热毒方组、强的松组。除正常对照组采用正常小鼠外,其余各组均采用cGVHD狼疮样小鼠模型。两给药组分别按一定比例将补肾清热毒方药物(旱莲草、枸杞子、金银花、丹皮、益母草等)和强的松掺入到普通饲料中喂饲,正常对照组则进食等量普通饲料。两组均用药8周。采用原位末端标记法(TUNEL)染色观察肾组织细胞凋亡;免疫组化、蛋白印记和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测Fas、FasL基因转录及蛋白表达情况。5ti, http://www.100md.com
TUNEL检测结果表明,正常对照组无TUNEL阳性细胞,模型组阳性细胞较正常对照组明显增多,补肾清热毒方组、强的松组阳性细胞也明显增多,但与模型组不同,主要为小管上皮细胞、浸润的炎细胸以及少量系膜细胞。5ti, http://www.100md.com
免疫组化检测表明,各组Fas均有表达,但正常对照组仅有少量表达;补肾清热毒方组、强的松组与正常对照组比较,肾小球与肾间质Fas阳性细胞表达高;与模型组比较,两组肾间质Fas表达高,肾小球表达无显著性差异;补肾清热毒方组和强的松组之间Fas表达无显著性差异。两组Fas阳性细胞主要为肾小管间质细胞,而少有肾小球细胞,可以导致模型鼠治疗后肾小球细胞凋亡较少而肾小管间质细胞凋亡较多。可见,补肾清热毒方和强的松可以通过上调凋亡调控基因Fas的表达而促进增生的固有细胞和浸润的炎细胞凋亡。5ti, http://www.100md.com
蛋白印记检测表明,补肾清热毒方组和强的松组Fas、FasL表达较正常对照组多;与模型组比较,两基因表达也增高,但与免疫组化检测不同,Fas表达与模型组无显著性差异。这可能是由于蛋白印记检测的是肾组织的总蛋白,而免疫组化分别对肾小球和肾小管间质进行半定量分析所致。5ti, http://www.100md.com
RT-PCR结果显示,补肾清热毒方组和强的松组FasmRNA水平较正常对照组和模型组高,补肾清热毒方组和强的松组之间无显著性差异。提示补肾清热毒方和强的松均可通过促进Fas的基因转录而上调其蛋白表达水平。5ti, http://www.100md.com
至于FasL蛋白的表达,补肾清热毒方组和强的松组均较模型组增高,蛋白印记检测结果与免疫组化结果一致。说明补肾清热毒方和强的松有上调FasL的作用。补肾清热毒方组和强的松组FasLmRNA水平较正常对照组和模型组高,但补肾清热毒方组和强的松组比较无显著性差异。提示补肾清热毒方组和强的松组FasL表达的增多可能是FasLmRNA转录水平增高所致。5ti, http://www.100md.com
研究人员介绍,FasL与靶细胞的Fas结合,能启动靶细胞凋亡的信号转导,使之进入凋亡过程。LN的发生与Fas、FasL及细胞凋亡密切相关。本研究结果提示,补肾清热毒方与强的松作用相似,均可通过上调Fas、FasL的表达,使Fas和FasL结合,从而促进表达部位凋亡不足的细胞凋亡,发挥保护肾组织的结构和功能的作用。5ti, http://www.100md.com
(陈杨荣 任文英 江明)(陈杨荣;任文英;江明 )