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编号:10625154
肺炎衣原体抗体的制备及应用
http://www.100md.com 《中华医学实践杂志》 2005年第5期
肺炎衣原体多克隆抗体,肺炎衣原体多克隆抗体,肺炎衣原体单克隆抗体,微量免疫荧光,外周血单核细胞,1材料与方法,2结果,3讨论,参考文献
     【摘要】 目的 肺炎衣原体抗体(Cpn-PcAb)的制备及应用。 方法 用10μl Cpn菌株TW-183(2×10 8 ifu)与300μl福氏完全佐剂混匀后皮下多点注射新西兰白兔。双向琼脂扩散法鉴定血清抗体的效价为1∶64,用硫酸铵盐析法、DEAE-Sephadex-50层析法纯化免疫球蛋白(IgG),然后用异硫氰酸荧光素(FITG)标记IgG。用Cpn-PcAb与美国进口Cpn-单抗(Cpn-McAb)同时检测病人外周血标本294例。另外,分别从Cpn-PcAb检测出Cpn特异性抗原阳性的外周血单核细胞(PBMC)标本(A组)中和对照组(B组)中随机各挑选20例,用PCR检测PBMC中的Cpn-DNA。 结果 Cpn-PcAb检测的阳性率为45.9%(135/294),Cpn-McAb检测的阳性率为43.5%(128/294),两种抗体同时阳性的标本有110例,Kappa值是0.7,根据其判断标准提示两者有较高的一致性。A、B两组Cpn-DNA阳性标本分别为17例和3例。 结论 Cpn抗体几乎和Cpn单抗一样有较高的特异性和敏感性,可能可以替代进口单抗用于临床Cpn感染的检测,有助于相关疾病的诊治。

    【关键词】 肺炎衣原体多克隆抗体 肺炎衣原体单克隆抗体 微量免疫荧光 外周血单核细胞

    Production and application of polyclonal antibody to chlamydia pneumoniae

    Wang Weiqun,Zhang Ruihua,Yu Zhuyuan.

    Department of Cardiology,Jinshan Hospital,Fudan University,Shanghai200540.

    【Abstract】 Objective Production and application of polyclonal antibody to chlamydia pneumoniae(Cpn).Methods The New Zealand white rabbit was subcutaneously injected with10μl Cpn strain TW-183(2×10 8 ifu)and300μl complete Freund adjuvant.The serum antibody titer of1∶64was identified by two dimensional immunodiffu-sion test.IgG was extracted from serum and purified by ammonium sulphate salting out and DEAE-Sephadex A-50chromatography ......

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