【摘要】 目的 建立肝豆状核变性的肝细胞原代培养模型，并采用超微制片技术获细胞超微结构，使之对该疾病的研究能达到细胞超微结构水平。 方法 对肝豆状核变性患者采用外科手术取肝组织，应用Ⅳ型离体胶原酶消化分离的方法获的肝组织细胞悬液。再用差速离心机将肝细胞和其他细胞分离提纯后对肝细胞原代培养7～10天。收集培养细胞，利用超微制片技术获肝细胞的超微结构。 结果 取肝豆状核变性患者肝细胞，通过台酚兰染色示即时存活率可达95%。肝细胞培养7天后细胞存活率可达90%，细胞纯度达90%，细胞收集量达5×10 5 个。用超薄切片技术制片，在透射电镜下观察可见肝豆状核变性患者肝细胞胞浆及溶酶体内有铜颗粒聚集。 结论 采用肝细胞培养模型可消除由于不同个体内环境的差异对细胞的影响，铜障碍的缺陷利用超微制片技术使细胞在超微结构水平得以表达，提高了实验精确度，为HLD病机制的研究及新药的开发提供了新的途径。

    【关键词】 肝豆状核变性 原代培养 细胞分离 超薄制片 超微结构

    Hepatic cell isolating，culturing technique and ultramicrotomy on HLD patients

    Hu Wen，Chen Ke，Wu Hongyang，et al.

    Department of Pathology，Anhui Provincial Hospital，Hefei230001.

    【Abstract】 Objective To establish the hepatic cell primarily culture model on HLD patients and accquire the cell ultrastructure，then the disease can be studied under ultrastructural level.Methods The surgical hepatic tissue from HLD patients was digested and isolated to cell suspendion by exsomatize collagenase IV.The hepatic cells were purificated by gradient centrifugal machine ......