小鼠蛋白激酶CK2β亚基的克隆、表达及活性测定
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陈小文；郑克勤；梁景耀；刘新光；梁念慈
β调节亚基蛋白激酶CK2,小鼠|分子克隆|DNA测序|表达|免疫印迹,关键词：
参见附件(96kb)。
陈小文；郑克勤；梁景耀；刘新光；梁念慈 广东医学院生物化学和分子生物学研究所 湛江524023现工作单位:深圳市儿童医院儿科研究所 基础医学与临床 2003 4
关键词：β调节亚基蛋白激酶CK2/小鼠；分子克隆；DNA测序；表达；免疫印迹
通过反转录PCR从NIH 3T3小鼠成纤维细胞中获得小鼠蛋白激酶CK2 β亚基编码区cDNA ;构建其表达质粒并经测序证明其编码小鼠蛋白激酶CK2 β亚基,但与两种已报道的小鼠CK2 β亚基cDNA编码区序列分别存在一个碱基差异,与大鼠、猪、兔和人CK2 β亚基cDNA的编码区相应碱基序列则一致。将其在表达菌BL2 1(DE3)中诱导表达,出现一2 6kDa分子量蛋白过度表达,表达蛋白占菌体总蛋白的31 7%,但大多数以不溶形式存在。Westernblot鉴定表明:过度表达产物能与抗人CK2 β亚基抗体发生特异性免疫反应。当CK2α和β亚基以1:1摩尔比混合时,构成性的CK2全酶显示出最大活性,直...
关键词：β调节亚基蛋白激酶CK2/小鼠；分子克隆；DNA测序；表达；免疫印迹
通过反转录PCR从NIH 3T3小鼠成纤维细胞中获得小鼠蛋白激酶CK2 β亚基编码区cDNA ;构建其表达质粒并经测序证明其编码小鼠蛋白激酶CK2 β亚基,但与两种已报道的小鼠CK2 β亚基cDNA编码区序列分别存在一个碱基差异,与大鼠、猪、兔和人CK2 β亚基cDNA的编码区相应碱基序列则一致。将其在表达菌BL2 1(DE3)中诱导表达,出现一2 6kDa分子量蛋白过度表达,表达蛋白占菌体总蛋白的31 7%,但大多数以不溶形式存在。Westernblot鉴定表明:过度表达产物能与抗人CK2 β亚基抗体发生特异性免疫反应。当CK2α和β亚基以1:1摩尔比混合时,构成性的CK2全酶显示出最大活性,直...
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