核受体辅助抑制因子中ETO结合结构域的确定
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王敏；郝长来；唐克晶；邢海燕；田征；张屹；王建祥
白血病|髓系|核受体辅助抑制因子|基因|ETO,关键词：
参见附件(61kb)。
王敏；郝长来；唐克晶；邢海燕；田征；张屹；王建祥 中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所、血液病医院血液肿瘤实验室；实验血液学国家重点实验室 中华血液学杂志 2002 11
关键词：白血病；髓系；核受体辅助抑制因子；基因；ETO
目的 为消除急性髓系白血病标志基因AML1/ETO的活性 ,确定核受体辅助抑制因子(nuclearreceptorco repressor,N CoR)与ETO基因相互作用的活性部位。方法 用PCR扩增不同区段的N CoR(N CoRY) ,克隆入酵母表达质粒pGADGL中 ,构建获得pGADGL/N CoRY。应用酵母双杂交技术及X gal染色确定pGADGL/N CoRY 10个区段的N CoR是否与ETO结合。结果 N CoR的 988～ 112 6氨基酸残基与 15 5 1～ 180 1氨基酸残基共存时 ,才能与ETO发生结合作用 ,是与ETO相互作用的结构域。结论 N CoR两个结构域能与ETO的两个锌指结构作用 ,保持两种蛋白之间的稳定结合。
关键词：白血病；髓系；核受体辅助抑制因子；基因；ETO
目的 为消除急性髓系白血病标志基因AML1/ETO的活性 ,确定核受体辅助抑制因子(nuclearreceptorco repressor,N CoR)与ETO基因相互作用的活性部位。方法 用PCR扩增不同区段的N CoR(N CoRY) ,克隆入酵母表达质粒pGADGL中 ,构建获得pGADGL/N CoRY。应用酵母双杂交技术及X gal染色确定pGADGL/N CoRY 10个区段的N CoR是否与ETO结合。结果 N CoR的 988～ 112 6氨基酸残基与 15 5 1～ 180 1氨基酸残基共存时 ,才能与ETO发生结合作用 ,是与ETO相互作用的结构域。结论 N CoR两个结构域能与ETO的两个锌指结构作用 ,保持两种蛋白之间的稳定结合。
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