从外周血单个核细胞扩增多样性人免疫球蛋白基因的研究

http://www.100md.com 王刚；刘玉峰

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     王刚；刘玉峰 第四军医大学西京医院全军皮肤性病中心 710032西安 中华风湿病学杂志 2003 5

    关键词：基因,免疫球蛋白；单核细胞

    目的 建立成熟的体外扩增多样性人免疫球蛋白基因的实验方法。方法 设计多对具有简并性特点的人IgG、IgM扩增引物,从人外周血单个核细胞(PBMCs)中提取RNA并反转录为cDNA ,以其为模板聚合酶链反应(PCR)扩增人免疫球蛋白κ轻链基因和重链Fd段基因,对扩增产物进行凝胶电泳和DNA指纹分析鉴定。结果 利用不同引物进行的PCR反应均成功扩增出相应的免疫球蛋白基因,经鉴定所获得的基因产物具有良好的多样性,在天然抗角蛋白自身抗体研究和抗体库的构建中得到初步应用。结论 合理设计引物能够从PBMCs中成功扩增出多样性的人免疫球蛋白基因,为人抗体和相关免疫.

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