乙型肝炎病毒C基因重组逆转录病毒的构建和在真核细胞的表达
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丁传林；姚堃；张天泰；徐江英；许琳；彭光勇
肝炎病毒|乙型|逆转录病毒科|基因表达,关键词：
参见附件(60kb)。
丁传林；姚堃；张天泰；徐江英；许琳；彭光勇 兰州医学院附属第一医院内科；第二军医大学南京军医学院基因中心；南京医科大学微生物学与免疫学系 210029南京 中华实验和临床病毒学杂志 2003 1
关键词：肝炎病毒；乙型；逆转录病毒科；基因表达
目的 构建含HBVC基因的重组逆转录病毒以用于慢性乙型肝炎的免疫治疗。方法 用PCR法扩增HBV的C基因片段 ,定向插入逆转录病毒质粒载体pLXSN中 ,重组质粒用脂质体转染包装细胞PT67,G418筛选抗性细胞 ,用抗性细胞培养上清液中的重组病毒感染NIH3T3、EL4和鼠骨髓来源的树突状细胞 (DC) ,用PCR检测目的基因的插入 ,用间接免疫荧光和流式细胞仪检测目的基因的表达 ,基因修饰的DC免疫C57BL 6鼠观察其诱导细胞免疫的能力。结果 含HBVC基因重组质粒载体经PCR、酶切和序列分析鉴定为阳性 ,转染PT67后经G418筛选获得抗性细胞 ,抗性细胞培养上清液中含有重组逆...
关键词：肝炎病毒；乙型；逆转录病毒科；基因表达
目的 构建含HBVC基因的重组逆转录病毒以用于慢性乙型肝炎的免疫治疗。方法 用PCR法扩增HBV的C基因片段 ,定向插入逆转录病毒质粒载体pLXSN中 ,重组质粒用脂质体转染包装细胞PT67,G418筛选抗性细胞 ,用抗性细胞培养上清液中的重组病毒感染NIH3T3、EL4和鼠骨髓来源的树突状细胞 (DC) ,用PCR检测目的基因的插入 ,用间接免疫荧光和流式细胞仪检测目的基因的表达 ,基因修饰的DC免疫C57BL 6鼠观察其诱导细胞免疫的能力。结果 含HBVC基因重组质粒载体经PCR、酶切和序列分析鉴定为阳性 ,转染PT67后经G418筛选获得抗性细胞 ,抗性细胞培养上清液中含有重组逆...
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