新型基因工程干扰素受体结合域的改造及其生物活性测定
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胡荣；马学军；魏开坤；王虹；薛水星；段招军；侯云德；钱振超
干扰素α|抗体|病毒|DNA突变分析|受体|干扰素,关键词：
参见附件(55kb)。
胡荣；马学军；魏开坤；王虹；薛水星；段招军；侯云德；钱振超 中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室 中华实验和临床病毒学杂志 2002 2
关键词：干扰素α；抗体；病毒；DNA突变分析；受体；干扰素
目的 改造干扰素功能结合域 ,以提高干扰素的生物学活性。方法 在新型基因工程干扰素 (IFNα1c 86D)AB环内通过点突变技术引入 2个独立酶切位点EcoRⅤ和EstEⅡ ,用聚合酶链反应 (PCR)技术在干扰素cDNA水平对母体干扰素LoopAB的 31位甲硫氨酸换成天冬氨酸 (M D) ,32位天冬氨酸换成脯氨酸 (D P) ,将重组基因在大肠埃希菌中表达 ,用滤泡口炎病毒 (VSV) 人羊膜传代细胞 (WISH)系统检测抗病毒活性。用比色MTT实验检测抗增殖活性。结果 通过突变 ,31和 32位氨基酸获得重组突变体 31 32IFNα1c 86D ,经限制性内切酶图分析、DNA序列和抗病毒活性测定 ,初步...
关键词：干扰素α；抗体；病毒；DNA突变分析；受体；干扰素
目的 改造干扰素功能结合域 ,以提高干扰素的生物学活性。方法 在新型基因工程干扰素 (IFNα1c 86D)AB环内通过点突变技术引入 2个独立酶切位点EcoRⅤ和EstEⅡ ,用聚合酶链反应 (PCR)技术在干扰素cDNA水平对母体干扰素LoopAB的 31位甲硫氨酸换成天冬氨酸 (M D) ,32位天冬氨酸换成脯氨酸 (D P) ,将重组基因在大肠埃希菌中表达 ,用滤泡口炎病毒 (VSV) 人羊膜传代细胞 (WISH)系统检测抗病毒活性。用比色MTT实验检测抗增殖活性。结果 通过突变 ,31和 32位氨基酸获得重组突变体 31 32IFNα1c 86D ,经限制性内切酶图分析、DNA序列和抗病毒活性测定 ,初步...
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