人α、β珠蛋白基因以串联形式在大肠杆菌中的表达
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张浩；王全立；冯起；杜芝燕；李晓霞；毛秉智
血红蛋白|大肠杆菌|基因表达|α、β珠蛋白,关键词：
参见附件(43kb)。
张浩；王全立；冯起；杜芝燕；李晓霞；毛秉智 北京输血医学研究所；解放军总医院临床检验科；北京放射医学研究所；北京100850 中国输血杂志 2001 2
关键词：血红蛋白；大肠杆菌；基因表达；α、β珠蛋白
目的 为开展以基因重组血红蛋白为基础的血液代用品研究 ,尝试将人α、β珠蛋白基因以串联形式在大肠杆菌中进行表达。方法 采用常规的分子生物学技术。结果 用PCR扩增出含血红蛋白α、β珠蛋白的串联基因片段 ,测序表明克隆的α、β基因未发生意外突变。将该串联基因克隆进 pBV2 2 0表达载体 ,经热诱导表达产物达细菌总蛋白的 2 0 %左右。该表达产物以包涵体形式存在 ,并经WesternBlotting证实。 结论 为进一步开展人重组血红蛋白表达和纯化的研究奠定基础。
关键词：血红蛋白；大肠杆菌；基因表达；α、β珠蛋白
目的 为开展以基因重组血红蛋白为基础的血液代用品研究 ,尝试将人α、β珠蛋白基因以串联形式在大肠杆菌中进行表达。方法 采用常规的分子生物学技术。结果 用PCR扩增出含血红蛋白α、β珠蛋白的串联基因片段 ,测序表明克隆的α、β基因未发生意外突变。将该串联基因克隆进 pBV2 2 0表达载体 ,经热诱导表达产物达细菌总蛋白的 2 0 %左右。该表达产物以包涵体形式存在 ,并经WesternBlotting证实。 结论 为进一步开展人重组血红蛋白表达和纯化的研究奠定基础。
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