一种简便快速构建基因突变体的有效方法
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张铭湘；文剑；夏昆；郑多；张灼华；夏家辉
定点诱导突变|聚合酶链反应|基因,关键词：
参见附件(98kb)。
张铭湘；文剑；夏昆；郑多；张灼华；夏家辉 中南大学湘雅医学院医学遗传学国家重点实验室 中华医学遗传学杂志 2002 2
关键词：定点诱导突变；聚合酶链反应；基因
目的 介绍一种简便、快速、准确构建定点诱导突变体的新技术。方法 设计 3条引物 ,一条突变引物 ,另外两条引物位于突变引物的两侧 ,并带上合适的酶切位点 ,以供突变片段构建完成以后可以克隆进入合适载体。然后以突变引物与其附近的反向引物一起扩增带突变位点的片段 ,再以此 PCR产物片段为引物与剩下的另一条引物一起扩增 ,扩增出的片段带有合适的酶切位点可以克隆进入合适载体。结果用该方法成功地在 Parkin基因的 719bp处 C→ T和 913bp处 C→ T构建成两种突变。结论 该方法简便、快速、准确 ,确保 10 0 %的突变率 ,可在任何基因上构建所需的点...
关键词：定点诱导突变；聚合酶链反应；基因
目的 介绍一种简便、快速、准确构建定点诱导突变体的新技术。方法 设计 3条引物 ,一条突变引物 ,另外两条引物位于突变引物的两侧 ,并带上合适的酶切位点 ,以供突变片段构建完成以后可以克隆进入合适载体。然后以突变引物与其附近的反向引物一起扩增带突变位点的片段 ,再以此 PCR产物片段为引物与剩下的另一条引物一起扩增 ,扩增出的片段带有合适的酶切位点可以克隆进入合适载体。结果用该方法成功地在 Parkin基因的 719bp处 C→ T和 913bp处 C→ T构建成两种突变。结论 该方法简便、快速、准确 ,确保 10 0 %的突变率 ,可在任何基因上构建所需的点...
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