抗CD71人-鼠嵌合抗体(D2C)的构建和表达
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王硕；蒋琳；叶庆；朱慧芬；杨敬；邵静芳；沈关心
CD71|人鼠嵌合抗体|构建|表达,关键词：
参见附件(57kb)。
王硕；蒋琳；叶庆；朱慧芬；杨敬；邵静芳；沈关心 江汉大学医学与生命科学学院 武汉430056；华中科技大学同济医学院免疫学研究所免疫学系 武汉430030 中国免疫学杂志 2003 10
关键词：CD71；人鼠嵌合抗体；构建；表达
目的:构建抗CD71人 鼠嵌合抗体的真核细胞表达载体并在真核细胞中表达嵌合抗体。方法:将鼠源性抗CD71单抗(75 79)重、轻链可变区基因(VH 和VL)分别克隆至含有人IgG轻、重链恒定区的表达载体pγExpr和pκExpr中;将嵌合表达载体(Chi75 79 pγExpr和Chi75 79 pκExpr)经电转染技术共转染至真核细胞(SP2 0 )中。结果:经ELISA法检验阳性转染瘤细胞培养上清,证明其表达蛋白产物中同时具有人IgG重链恒定区(Cγ)和轻链恒定区(Cκ)蛋白;通过间接免疫荧光流式细胞术(FCM)和间接免疫荧光显微技术,证明该表达产物能够特异性识别和结合表达于靶细胞表面的CD71分子。
关键词：CD71；人鼠嵌合抗体；构建；表达
目的:构建抗CD71人 鼠嵌合抗体的真核细胞表达载体并在真核细胞中表达嵌合抗体。方法:将鼠源性抗CD71单抗(75 79)重、轻链可变区基因(VH 和VL)分别克隆至含有人IgG轻、重链恒定区的表达载体pγExpr和pκExpr中;将嵌合表达载体(Chi75 79 pγExpr和Chi75 79 pκExpr)经电转染技术共转染至真核细胞(SP2 0 )中。结果:经ELISA法检验阳性转染瘤细胞培养上清,证明其表达蛋白产物中同时具有人IgG重链恒定区(Cγ)和轻链恒定区(Cκ)蛋白;通过间接免疫荧光流式细胞术(FCM)和间接免疫荧光显微技术,证明该表达产物能够特异性识别和结合表达于靶细胞表面的CD71分子。
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