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关键词：脑梗塞；白细胞；粘附性；流变性
摘 要 目的 探讨外周血白细胞变形能力(LD)和白细胞粘附功能(LAF)的变化与急性脑梗塞病情的相关性。方法 检测68例急性脑梗塞患者发病后第3、7、15、21天和60例健康人LD和LAF的变化。结果 急性脑梗塞患者LD明显降低，LAF明显增高。与对照组比较有显著差异(P<0.001)，且病程在第3天前LD和LAF变化更明显。有并发症患者LD和LAF变化较无并发症者更明显 (P < 0.001)。结论 LD降低和LAF增高与急性脑梗塞病情变化有关。
急性脑梗塞患者红细胞变形能力明显降低，且与病情严重程度有一定关系[1] 。但其白细胞变形能力(LD)和白细胞粘附功能(LAF)的变化及与病情严重程度的关系尚未见报道。本文通过对急性脑梗塞患者外周LD和LAF的动态观察，探讨其改变的规律及与病情严重程度的关系。
1 对象和方法
1.1 研究对象
1.1.1 脑梗塞组 选择1996年12月～1997年5月我院神经科住院的急性脑梗塞(ACI)患者68例，男43例，女25例，年龄34～76岁，平均58.1岁。所有病例均符合1986年全国第二次脑血管病学术会议制定的诊断标准，均经头部CT确诊。
1.1.2 对照组 选择同期健康查体者60例，男37例，女23例，年龄41～66岁，平均56.3岁。除外脑血管病、冠心病、糖尿病、恶性肿瘤及肝、肾疾病患者。
1.2 实验方法
1.2.1 标本采集 所有标本均为肘静脉血(EDTA二钠抗凝)。采血时间：对照组为空腹;脑梗塞组于发病后3天内采血作为第1次标本,然后在病程第7、15、21天时采血。
1.2.2 LD检测[2] 采用Percol液分离白细胞，用Tris缓冲液(Tris10mmol/L,CaCl2 2mmol/L,Glucose 10mmol/L,NaCl 154mmol /L,pH7.40)洗涤3遍，配制成终浓度为3×109 /L的白细胞悬液(台盼蓝染色，白细胞活力>95%)。采用DXC-300A型核孔膜红细胞变形能力测定仪(上海医科大学)，于-1.96kPa压力测定白细胞悬液和缓冲液最初0.5ml的滤过时间(tb和ts)，计算白细胞滤过指数(LFI)作为LD的指标。LFI值越大，LD愈低;LFI值越小，LD愈高。
1.2.3 LAF检测[3] 采用WYJ-Ⅳ型体外血栓血小板粘附两用仪(无锡医疗仪器厂)，测定粘附前后白细胞数量，计算白细胞粘附率(LAR)作为LAF指标。LAR愈大，LAF愈小；LAR愈小，LAF愈大。
1.3 统计学处理 LFI和LAR均以±s表示，组间结果比较采用t检验和方差分析，相关关系采用直线相关分析。
2 结 果
2.1 脑梗塞病人LD和LAF的变化 脑梗塞病人LFI和LAR明显增高，与对照组比较，差异均有极显著性(t=4.130～9.122,P<0.001)，第3～21天患者LFI和LAR逐渐降低，但第3、7、15、21天LFI、LAR间的比较差异具有显著性(F=47.65,P<0.001)(见表1)。脑梗塞病人LFI与LAR呈正相关 (r = 0.6275,P<0.001)
表1 ACI患者与对照组LFI、LAR测定结果(±s)
| 组别 | 例数 | LFI | LAR(%) |
| 对照组 | 60 | 4.15±0.36 | 22.64±4.70 |
| ACI组 | 68 | ||
| 3d | 6.38±0.66* | 77.22±6.92* | |
| 7d | 5.81±0.13 | 65.40±8.30 | |
| 15d | 5.12±0.10 | 48.37±5.60 | |
| 21d | 4.95±0.08 | 42.75±4.63 |
注：与对照组比较*P<0.001；第3、7、15、21天之间比较P<0.001
2.2 不同病期患者LFI、LAR的变化 有并发症的ACI患者LFI和LAR明显增高，尤其在第3、7天时LFI和LAR较同时间无并发症者增高更明显，两组比较差异有显著性(t=4.580～7.860,P<0.001)(见表2)。
表2 有无并发症的ACI患者LFI和LAR的变化
| 时间 | 有并发症组 | 无并发症组 | ||
| LFI | LAR(%) | LFI | LAR(%) | |
| 3d 7d 15d 21d | 7.45±0.12△ 6.87±0.09△ 5.60±0.70△ 4.95±0.04* | 81.07±6.65△ 75.30±5.07△ 51.43±6.15△ 45.47±6.84* | 6.01±0.13 5.22±0.15 4.26±0.04 4.03±0.05 | 68.35±5.12 62.44±7.66 40.72±5.80 38.12±2.10 |
注：与无并发症者比较△P<0.001;*P<0.01
3 讨 论
近年来，白细胞及内皮细胞相互作用的研究已引起很大的关注，ACI对白细胞及其内皮细胞粘附的研究已取得了很大的进展，在动物缺血模型中的研究已深入到分子水平。但是，LD和LAF与ACI病情的相关性尚未见报道。本文结果显示：ACI患者外周血LD明显降低，而LAF明显增高。ACI患者早期(3天以内)和有并发症者更明显。说明外周血LD和LAF变化与缺血及脑细胞损伤的程度有关。急性脑梗塞病人3周内不同时间LD和LAF变化(早期LD降低和LAF增高,到后期LD增高和LAF降低)为临床早期判断脑梗塞病情程度提供了可能性。由于白细胞取材方便，检测简单易行，故有极高的临床实际应用价值。
LD降低和LAF增高可直接影响微循环血液流态和组织器官的血液供应。白细胞是引起血流动力学阻力增高和缺血后脑组织损伤的主要因素。急性脑梗塞时LD降低和LAF增高的原因可能与白细胞粘附分子表达增加有关[4] 。LD降低，白细胞不易通过毛细血管而粘附于其中，且粘附功能增高的白细胞大量聚集于缺血脑组织中，机械性阻塞微循环通路，影响脑组织(特别是缺血半暗带)的血液供应，妨碍物质交换，加重缺血后脑损伤[5～7] 。同时，聚集于脑组织中的白细胞互相激活，释放多种活性物质如白三烯、溶酶体酶和氧自由基等，损害局部的血管，导致血管通透性增加，造成脑水肿。进入组织的白细胞可进一步释放上述毒性物质，破坏幸存的神经元和胶质细胞，从而更加重神经组织的损伤。此外，白细胞还释放一些炎性介质和细胞因子，加重炎性反应，从而吸引更多的白细胞进入组织，造成恶性循环，直到组织完全破坏[8] 。这些可能是脑梗塞病情反复和预后不良的重要原因。
本文结果显示，LD降低和LAF增高与急性脑梗塞病情严重程度有关，故临床上可以LD和LAF作为早期判断急性脑梗塞病情严重程度的一个参考指标。
参考文献
1 于义英，毛德军，赵振升，等.老年人急性脑梗塞病人红细胞变形能力与红细胞ATP酶活性关系的研究.临床神经病学杂志，1997，10：77.
2 Franzin E,Martin FM,Chan MT. Leukocyte filterbility,its measurment in the laboratoryand effects of pentoxifylline. Clinical Hemorheology,1988,8:477.
3 梁维岗.白细胞粘附试验及其临床应用.上海医学检验杂志，1994，9：96.
4 Bienvenu K,Russell J,Granger DN. Platelet activating factor promotes shearrate-dependent leukocyte adhesion in postcapillary venules. J Lipid Mediat,1993,8:95.
5 Ernst E,Matrai A,Paulsen F. Leukocyte rheology in recent stroke. Stroke,1987,18:59.
6 Schmid-Schonbein GW. Capillary plugying by granulocytes and the noreflow phenomenonin the microcirulution. Fed Proc,1987,46:397.
7 Hallenbeck JM,Dulka AT. Background review and current concepts of reperfusion injury.Arch Neurol,1990,47:1245.
8 姜亚军，何家声，丁德云.脑缺血/再灌注期间白细胞粘附机制的研究进展.国外医学脑血管病分册，1996，4：262.
(1998-07-07收稿 1998-11-04修回) , 百拇医药