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编号:10678007
BDNF重组腺病毒的构建及在大鼠骨髓间质干细胞的表达
http://www.100md.com 李红乐;李浩威;邢飞跃;孙学刚;邓宇斌;张秀明;姜勇;李树浓
骨髓|干细胞|脑源性神经营养因子|腺病毒|绿色荧光蛋白|基因融合,关键词:
    参见附件(158kb)。

     李红乐;李浩威;邢飞跃;孙学刚;邓宇斌;张秀明;姜勇;李树浓 中山大学中山医学院病理生理学教研室 广东广州510080;第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室 广东广州510515 中国病理生理杂志 2003 4

    关键词:骨髓;干细胞;脑源性神经营养因子;腺病毒;绿色荧光蛋白;基因融合

    目的 :利用大肠杆菌细菌内同源重组构建带有增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因的脑源性神经营养因子前体 (proBDNF)和脑源性神经营养因子 (BDNF)重组腺病毒并在大鼠骨髓间质干细胞 (rMSC)高效表达。方法 :采用两步亚克隆的方法将proBDNF和BDNF构建入带有EGFP表达盒的腺病毒穿梭质粒pAdTrack -CMV中 ,形成转移载体pAdTrack -proBDNF和pAdTrack -BDNF ,采用化学转化法在大肠杆菌BJ5 183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy- 1同源重组 ,得到重组腺病毒载体pAd -proBDNF和pAd -BDNF ;转染 2 93细胞 ,包装成重组病毒颗粒 ;将重组病毒上清感染rMSC ,用荧光显微镜下观...

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