关键词：喘息性疾病；小儿；呼吸道病毒；肺炎支原体
摘要 目的： 了解小儿喘息性疾病的病原体。方法： 对120例住院的喘息患儿应用桥联酶标法(APAAP)及聚合酶链反应法(PCR)检测呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、腺病毒及肺炎支原体。结果及结论： 病毒检出阳性47例，占39.2%，其中呼吸道合胞病毒最高，阳性27例，占22.5%，6个月以下小儿占感染的74%；流感病毒、腺病毒阳性率分别是10%、6.7%。肺炎支原体阳性24例，占20%。总阳性71例，占59.2%。提示喘息性疾患由病毒感染引起，呼吸道合胞病毒是主要病毒，肺炎支原体是引起3岁以上小儿喘息的主要病原。
小儿喘息性疾病是儿科常见的急性呼吸道疾患，临床表现起病急、咳嗽和气喘。近年来，发病率有增高趋势，为探讨本地区该病的病原，我院呼吸科对1997年全年收治的120例喘息患儿作呼吸道病毒及肺炎支原体检测，现将结果报告如下。
对象与方法
1.对象：临床上有咳喘、伴有/无发热症状的住院患儿120例，男70例，女50例；2～6个月59例，～1岁26例，～2岁18例，～3岁5例，～7岁9例，～14岁3例。按照《实用儿科学》诊断标准，分别诊断为毛细支气管炎88例，支气管哮喘20例(含婴幼儿哮喘9例)，喘息性支气管炎12例。
2.方法：标本采集为患儿入院24小时内将硅胶导管插入鼻咽部，通过电动吸引器的负压吸取鼻咽部分泌物少量至导管，然后将分泌物置于无菌生理盐水试管内送本院感染实验室。
操作方法为应用桥联酶标法(APAAP)。取材后加入抗粘液剂2～3滴，用滴管反复吹打至粘液稀薄，离心弃上清，重复2次后，取沉淀细胞涂片，吹干后用丙酮将标本固定备用。将封闭液以0.35ml PBS溶解后，加于标本上，置湿盒37℃ 15分钟，取出后用PBS冲洗2～3次，PB冲洗1次，吹干。以后分别加一抗、二抗、三抗，每次加入后，均置湿盒37℃15分钟，取出后用PBS冲洗2～3次，PB冲洗1次，风扇吹干。然后按比例配制底物工作液，加于标本上，置湿盒37℃7～10分钟，PBS冲洗。结果判定，凡找到三个以上典型着色细胞，即可判为阳性，否则为阴性。上法可同时检测合胞病毒(RSV)、流感A(FluA)、流感B(Flu B)、副流感1.3(PIV 1.3)、副流感2(PIV 2)和腺病毒(Adv3.7)。肺炎支原体(MP)则采用聚合酶链反应法(PCR)。
结 果
1.病毒检出结果：120例标本检出呼吸道病毒47例，占39.2%，其中RSV27例，阳性率22.5%，Flu A 12例，阳性率10%，Adv 8例，阳性率6.7%。Flu B及PIV均未检出。
2.MP检出结果：120例标本中阳性24例，阳性率20%。
120例标本共检出病原体71例，阳性率59.2%。其与疾病、季节、年龄的关系见表1～3。
表1
喘息性疾病与病原分布关系(例数)| 疾 病 | 检测例数 | 阳性率(%) | 病毒种类 | MP | 合计 | ||
| Rsv | FluA | Adv | |||||
| 毛细支气管炎 | 88 | 53.4 | 24 | 9 | 6 | 8 | 47 |
| 支气管哮喘 | 20 | 80 | 1 | 1 | 1 | 13 | 16 |
| 喘息性支气管炎 | 12 | 66.7 | 2 | 2 | 1 | 3 | 8 |
| 合 计 | 120 | 59.2 | 27 | 12 | 8 | 24 | 71 |
表2 季节与病原分布关系(例数)
| 月 份 | 检测例数 | 阳性率(%) | 病毒种类 | MP | 合计 | ||
| Rsv | FluA | Adv | |||||
| 1～3 | 55 | 56.4 | 16 | 6 | 5 | 4 | 31 |
| 4～6 | 30 | 43.3 | 6 | 3 | 1 | 3 | 13 |
| 7～9 | 10 | 60 | 0 | 1 | 0 | 5 | 6 |
| 10～12 | 25 | 84 | 5 | 2 | 2 | 12 | 21 |
| 合 计 | 120 | 59.2 | 27 | 12 | 8 | 24 | 71 |
表3
年龄与病原分布关系(例数)| 年 龄 | 检测例数 | 阳性率(%) | 病毒种类 | MP | 合计 | ||
| Rsv | FluA | Adv | |||||
| <6月 | 59 | 57.6 | 20 | 7 | 5 | 2 | 34 |
| ～1岁 | 26 | 50 | 4 | 3 | 2 | 4 | 13 |
| ～2岁 | 18 | 61 | 2 | 2 | 1 | 6 | 11 |
| ～3岁 | 5 | 60 | 1 | 0 | 0 | 2 | 3 |
| ～7岁 | 9 | 78 | 0 | 0 | 0 | 7 | 7 |
| ～14岁 | 3 | 100 | 0 | 0 | 0 | 3 | 3 |
| 合 计 | 120 | 59.2 | 27 | 12 | 8 | 24 | 71 |
讨 论
本院呼吸科病房1997年全年收治喘息性疾病120例，占同期收住急性下呼吸道感染病人的14.3%，与1979～1988年全国30个省市统计的4.8%相比[1] ，明显增高。已经证实，病毒及支原体感染与喘息有密切关系[2] 。因此，研究喘息性疾病的病原体，对指导临床用药，克服滥用抗生素现象非常重要。关于标本采集，一致认为[3] ，鼻咽部分泌物可以反映下呼吸道病毒病原。而肺炎支原体由于粘附于呼吸道上皮细胞表面，用PCR法测定具有快速、灵敏、特异性强的优点[4] 。我们通过对呼吸道病毒及MP检测，揭示了在小儿喘息性疾病中，病毒及支原体感染率59.2%，其中病毒感染是主要原因，占39.2%，MP感染占20%。
本组喘息患儿，主要见于2岁以下的婴幼儿，其中6个月以下的小婴儿59例，占病人总数的49.2%，临床上大多表现为毛细支气管炎，其病原以病毒感染为主，占44.3%(39/88)，其中RSV是主要的病毒，占57.4%(27/47)。由表2，3可见，病毒感染主要见于2岁以下小儿，以6个月内为高峰，并随着年龄的增长而减少，3岁以上极少，且以冬春季节发病较高。与有关报道一致[5] 。
本组检测结果，支原体感染率仅次于RSV，占20%，虽低于青岛市儿童医院38.57%的报道[6] ，但究其原因，两组病人发病年龄、病种都存在明显差异。本组结果表明，MP感染随着患儿年龄的增长而增多，成为3岁以上儿童，特别是诱发小儿哮喘的主要病原菌，虽然一年四季均有散发，但以秋冬季为多。
副流感病毒感染在我国北方次于合胞病毒及腺病毒肺炎，是婴幼儿肺炎及毛细支气管炎的常见病原，而本组病人均未检出副流感病毒各型，故认为该病毒在当年本地区未流行。
参 考 文 献
1 全国儿科哮喘协作组.1979～1988年30省市喘息性疾病住院患儿情况调查.中华儿科杂志，1992，30(4)：205.
2 张梓荆主编.小儿病毒性呼吸道感染与病毒性肺炎.北京：中国医药科技出版社，1990，342～344.
3 中华医学会儿科学会呼吸学组.儿童呼吸道感染病原学诊断研讨会纪要.中华儿科杂志，1995，33(6)：374.
4 辛德莉，李 贵，张继红，等.聚合酶链反应在肺炎支原体检测中的临床应用与研究.中华儿科杂志，1994，32(5)：296.
5 Boyer KM,Cherry JD.Pneumonias in children.Pediatrics update Reviews for physicians.LosAngeles.Elsevien Nooth Holland,1979,169～181.
6 秦 璞，杨瑞兰，马少春.聚合酶链反应对140例小儿喘息性疾病支原体检测结果及分析.中国实用儿科杂志，1996，11(1)：31. , 百拇医药