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关键词：皮肤疾病；活组织检查；免疫病理学
中图分类号 R75 文献标识码 A
文章编号 1001-7399(2000)01-0084-01
1 材料与方法
1.1 皮肤组织固定邮寄盒(简称邮寄盒) 取一块有凹陷的塑料薄板，凹陷内装有特制的皮肤组织固定剂，表面用不干胶塑料薄膜粘贴封盖。6个邮寄盒之间通过齿孔线连成一版。用时沿齿孔线折撕下一个邮寄盒，从虚角处揭开薄膜，将取自病人皮损处的新鲜皮肤组织埋入固定剂中，再按原样密封好，写上申请单联号或病人姓名，用特快专递邮寄。
1.2 标本处理及染色 收到标本后，用少许75%乙醇洗去组织表面固定剂，投入梯度乙醇脱水，二甲苯透明，浸蜡，石蜡包埋，3μm厚连续切片，分别做HE及两步法免疫组化染色。
1.3 免疫组化染色 兔抗人IgG、IgM、IgA、C3C 均为Dako公司产品；两步法免疫组化试剂、胰酶消化液和AEC显色剂均为美国MaximBiotech Inc的即用型产品(购于福州迈新公司)。切片脱蜡至水；高温高压处理，水洗2min；浸入3% H2 O2 10 min，PBS洗3次，每次2 min；胰酶37℃消化1～5min，PBS洗3次；滴加用5%鸭蛋清-1/500 NaN3 -PBS稀释成工作浓度的一抗，室温孵育1h，PBS洗3次；滴加二抗室温孵育10 min，PBS洗3次；AEC显色，水洗；无乙醇苏木精衬染，水洗；AEC封片。
1.4 镜下阅片 免疫组化结果按阴性、可疑±、弱阳性+、中阳性、强阳性判断，结合病史、HE染色片和免疫组化染色结果做出最后诊断。
1.5 病理报告 经传真或E-mail送达，报告原件另寄。
2 结果
1年来我们采用此法为3个省的7家医院，检查了28例皮肤标本，表1。其中18例标本是作皮肤狼疮带检查，12例狼疮带(表皮真皮连接处带状沉积)阳性，6例阴性；与血清学检查对照，狼疮带阳性的12例，血清学检查抗dsDNA均阳性；狼疮带阴性的6例血清学检查抗dsDNA5例阴性，1例可疑阳性。10例标本是为了鉴别大疱性疾病而送检，经免疫组化染色，其中3例表皮细胞间抗体阳性，诊断为天疱疮；6例抗基底膜带抗体阳性，诊断为大疱性类天疱疮；1例真皮乳头层IgA颗粒状沉积，诊断为疱疹样皮炎。阳性显色均达到～。
表1 邮寄皮肤标本免疫组化染色阳性病例的
抗体沉积部位和抗体类型
| 沉积部位 | 阳性例数 | 抗体类型(例数) | |||
| IgG | IgM | IgA | C3 | ||
| 狼疮带 | 12 | 12 | 7 | 3 | 11 |
| 表皮细胞间 | 3 | 3 | 0 | 0 | 2 |
| 基底膜带 | 6 | 6 | 2 | 0 | 6 |
| 真皮乳头部 | 1 | 1 | 1 | ||
3 讨论
我们最初将远程邮寄病理检验方法用于肾穿组织免疫病理检查，获得良好效果，因而将此法移植到皮肤活检免疫病理检查。实践证明，通过皮肤活检组织邮寄盒固定、并经长途邮寄的皮肤标本，免疫组化染色阳性率不低于本院的皮肤组织标本，而且背景清晰，阳性定位准确可靠；皮肤组织光镜图像良好，完全能够用于病理诊断。发报告的时间基本符合临床皮肤科诊断工作的需要；病理诊断的质量得到各家送检医师的普遍认可。
在两步法的实际操作中需注意：(1)本法将高温高压处理与胰酶消化结合使用，可以充分暴露免疫沉积物的抗原位点，提高阳性显色强度；如果单独使用其中一种方法效果都不太理想。(2)选购一抗时要注意抗体编号，选择适合免疫组化的抗体；一抗的工作浓度需结合说明书的提示，做预试验确定；采用5%鸭蛋清-1/500NaN3 -PBS稀释第一抗体比预先用10%血清封闭切片效果好。(3)在没有空调设备的实验室中，胰酶消化时间要随着室温的高低适当调整，一般而言，室温越高胰酶消化时间越短；冬季室温较低时一抗和二抗需置于37℃孵育。(4)皮肤标本的胰酶消化时间不宜长，否则会造成皮肤组织碎块状脱片，从而影响诊断。
作者简介：郑智勇，男，45岁，主任医师，全军定量病理诊断学组委员。研究方向：远程病理及图像分析
收稿日期：1999-09-13 修回日期：1999-11-08 , 百拇医药