张峰 杨国樑 袁宏银 解云涛 胡卫东 杨国樑(湖北医科大学肿瘤研究所)；张峰(第二附属医院肿瘤科，武汉430071)；袁宏银(第二附属医院肿瘤科，武汉430071)；解云涛(第二附属医院肿瘤科，武汉430071)；胡卫东(第二附属医院肿瘤科，武汉430071) 基础医学与临床 2000 0 20 2


    关键词：单纯疱疹病毒I型；胸苷激酶基因；聚合酶链式反应；克隆；序列测定 期刊 jcyxylc 0 研究论文 fur -->


    

摘要：为了分离、克隆单纯疱疹病毒I型(HSV-I)SM44株胸苷激酶基因(TK)，采用原代兔婴肾细胞培养HSV-ISM44株病毒，提取病毒核酸作为模板，设计了HSV-I TK基因的上、下游引物，在引物的5'端分别引入BamHI和EcoR I限制性内切酶位点，通过PCR方法扩增出TK基因，经BamH I /EcoR I双酶切与PUC19质粒载体相连接，构建重组体转化受体菌JM109，通过筛选和酶切鉴定，获得HSV-I SM44 TK基因阳性克隆，行全序列测定分析，与HSV-ICL101株TK基因同源性为99.02%，存在11个核苷酸和7个氨基酸的差异。HSV-ITK基因的克隆成功，为该基因应用于恶性肿瘤的自杀基因治疗奠定了基础。

    中图分类号：R373.1 文献标识码：A

    文章编号：1001-6325 (2000)02-0034-03

Cloning andsequencing of the thymidine kinase gene of herpes

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