内部核糖体进入位点控制hytk基因和绿色荧光蛋白的表达
绿色荧光蛋白|内部核糖体进入位点|hytk基因|基因治疗,关键词:
叶传忠(福建医科大学附属协和医院泌尿外科,福建350001);陈仕平(福建医科大学附属协和医院泌尿外科,福建350001);裴雪涛(军事医学科学院放射医学研究所 国家生物医学检测中心,北京100850);李梁(军事医学科学院放射医学研究所 国家生物医学检测中心,北京100850);冯凯(军事医学科学院放射医学研究所 国家生物医学检测中心,北京100850)
关键词:绿色荧光蛋白;内部核糖体进入位点;hytk基因;基因治疗
摘要:构建一种带有绿色荧光蛋白基因(gfp)和hytkcDNA(潮霉素磷酸转移酶和HSV-tk的融合基因)的新型真核表达载体,用于简便、快速地了解自杀基因在恶性肿瘤中的转染效率。利用脑炎心肌炎病毒(encephalomyocarditisvirus,EMCV)的内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES),将gfp的cDNA与hytk真核表达载体重组,构建获得含gfp和hytk基因的重组质粒;Lipofectin介导下分别转染COS-7细胞及人膀胱癌细胞株EJ,并检测其表达情况。结果示该载体在瞬时表达及稳定表达时均可获得hytk及gfp的良好表达。说明含gfp和hytk基因双顺反子真核表达载体的构建成功,为临床应用自杀基因治疗膀胱恶性肿瘤提供了新的治疗工具及随访检测手段。
中图分类号:Q591.2 文献标识码:A
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