应用改进的SSP-抑制PCR技术扩增Cdna片段旁侧序列
RACE|抑制PCR|单链特异引物PCR,关键词:
关键词:RACE; 抑制PCR; 单链特异引物PCR
肿瘤坏死因子α(TNFα)是由单核巨噬细胞系统分泌的一种多方面生物活性的细胞因子。它不仅介导肿瘤细胞溶解,且在物质和能量代谢中也发挥重要作用。本文以空腹血糖胰岛乘积(EGI)作为胰岛素抵抗的定量指标,通过对正常小鼠多种方式静脉注射TNFα,以比较观察TNFα对糖代谢的改变和胰岛素抵抗的发生的影响。
材料与方法 :TNFα由军事医学科学院提供,用5% BSA溶液配制。昆明小鼠(22~25g),雌雄不拘,随机分为低剂量1μg/(kg. h)连续注射组间隔30min一次、高剂量100μg/(kg. h)连续注射组间隔30min一次,和高剂量200μg/(kg. h)组,一次注射。对照组用等体积的5%BSA溶液注射。实验动物禁食过夜处死,收集血浆,-70℃保存,用于血浆TNFα,血糖,胰岛素,胰高血糖素和乳酸测定。
实验结果 :TNFα低剂量连续注射、高剂量连续注射均能引起正常小鼠胰岛素抵抗指标(FGI)及其相关指标(胰岛素、血糖、乳酸和胰高血糖素)的变化,尤其是低剂量连续注射对正常小鼠胰岛素抵抗指标(FGI)升高作用更为明显(见表1)。TNFα高剂量一次注射正常小鼠,除乳酸和胰高血糖素明显升高外 ......
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