大鼠组织中三磷酸肌醇受体亚型基因的表达

http://www.100md.com 《中国微循环》 1999年第4期

刘乃丰 董 莉 何家声 210009 江苏省南京市，南京铁道医学院附属医院 中国微循环 1999 0 3 4
关键词：三磷酸肌醇受体；胞浆游离钙；信号转导；血管平滑肌；培养的细胞；逆转录聚合酶链式反应 期刊 zgwxh 0 短篇报道-基础研究部分 fur -->

目的 观察大鼠心肌、小脑和培养的主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)中三磷酸肌醇受体(IP₃ R)亚型的基因表达。方法 用异硫氰酸胍-酸酚氯仿一步法抽提组织总RNA，用特异性引物进行逆转/聚合酶链式反应(RT-PCR)，β-actin为内标半定量检测IP₃ R亚型mRNA的表达。将Ⅱ型PCR产物重组、克隆并测序。结果 发现IP₃ R三个亚型在心肌、小脑和VSMC中均有表达，小脑组织中表达水平较高。PCR扩增片段分别为：Ⅰ型IP₃ R，525bp(小脑)或405bp(心肌VSMC)；Ⅱ型IP₃ R，405bp；Ⅲ型IP₃ R，169bp。结论 序列分析发现克隆的Ⅱ型IP₃ R cDNA序列与设计的目的cDNA一致，证实了本文RT-PCR的特异性和准确性，提示本文所建立的RT-PCR方法能可靠地研究动物组织中IP₃ R不同亚型的基因表达。

铁道部科技基金资助项目

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