特异点突变型p53 minigene对人肺癌PG细胞的转染效应
肺肿瘤|基因,p53|转染,特异点突变型p53minigene对人肺癌PG细胞的转染效应,关键词:
关键词:肺肿瘤;基因,p53;转染
【摘要】 目的 观察一种编码密码子172Arg→Leu 的特异点突变型小鼠p53minigene对恶性肿瘤细胞的转染效应,并探讨该基因在恶性肿瘤基因治疗中的潜在价值。方法 应用LipofectaMINE和电穿孔法,把该特异点突变型p53minigene的表达载体与表达载体PCMVneo共转染p53错义突变的人肺癌PG细胞系,并以野生型和相应的密码子172Arg→His 点突变型p53minigene 以及空载体转染为对照。应用小鼠特异性p53基因反转录聚合酶链反应和Northern杂交方法,检测外源性p53基因的mRNA转录。观察转基因后G418抗性克隆的克隆形成、细胞生长状态以及对抗癌药的敏感性改变,并应用脱氧核苷酰转移酶原位标记法分析该基因转染对细胞凋亡的影响。结果 密码子172Arg→Leu 点突变型小鼠p53基因组minigene转染后能较强抑制PG细胞G418抗性克隆的形成,细胞难以传代;基因瞬时表达后能导致细胞凋亡,提高PG细胞对抗癌药的敏感性,具有较野生型p53基因更强的抑瘤能力。结论 密码子172Arg→Leu 特异点突变型p53minigene 对肿瘤基因治疗有重要的潜在应用价值 ......
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