尿毒症血清对大鼠心肌损害的研究
关键词:
尿毒症并发心脏损害是尿毒症患者的重要致死原因之一,目前对其发生原因仍众说不一。我们通过乳鼠心肌组织培养技术,探讨尿毒症血清的心肌毒性作用。
一、材料和方法
1.实验动物:出生2~3天的SD大鼠。
2.血清及肌酐、尿素溶液:尿毒症患者20例、健康自愿者6例,无菌取血分离血清并测定其肌酐、尿素氮及甲状旁腺激素(PTH)浓度。称取纯肌酐、尿素分别配制不同浓度的溶液,见表1。以上液体0.45μm滤孔膜抽滤除菌。
3.实验方法:取SD大鼠,剖胸取心脏,剪开,经冷D-Hank液冲洗三遍。将心脏剪成直径约1mm大小的碎块,立即接种于25ml培养瓶中,37 ℃ CO2 孵育箱中孵育1小时,待其贴壁加入含小牛血清(15%)的1640培养基,培养2~3天。选搏动良好的心肌组织分别加入尿毒症血清、正常血清及配制的不同浓度的肌酐、尿素溶液,并设置不加任何血清的空白对照。培养72小时后观察其心肌搏动率,检测心肌酶、环磷酸腺苷(cAMP)浓度,并行电镜、光镜检查。
二、结果
1.心肌搏动率:加入尿毒症血清及高浓度肌酐(>884μmol/L)、尿素氮浓度(50 mmol/L)均使心肌搏动率增快 ......
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