张毅 唐佩弦 李秀森 江飞子 孙建民 毛宁 100850 北京，军事医学科学院基础医学研究所 中华血液学杂志 1999 0 20 12


    关键词：细胞株，HFCL；基因；配体；血小板源生长因子；基因表达 期刊 zhxyxzz 0 专 论 fur -->


    

【摘要 】 目的 探讨应用内部核糖体进入位点(IRES)序列对逆转录病毒介导的人Flt3配基(FL)与血小板生成素(Tpo)基因在骨髓基质细胞系HFCL中的表达。方法 利用基因重组技术将IRES序列与FL和Tpo基因构建到逆转录病毒载体中，脂质体法将重组质粒pLFTSN和空载体pLXSN转染PA317细胞，经G418筛选。用抗性克隆培养上清感染HFCL细胞，RT-PCR和基因组DNAPCR分析mRNA的表达及基因组整合情况，CFU-GM集落法和Tpo依赖株法测定生物学活性。结果 成功构建出含IRES序列的FL与Tpo基因逆转录病毒载体，mRNA水平及基因组中整合有FL与Tpo基因，生物学活性测定表明转染的骨髓基质细胞同时分泌FL与Tpo。结论 IRES序列调控FL与Tpo双基因在骨髓基质细胞中同时独立表达，为进一步研究转基因骨髓基质细胞对造血调控的影响奠定了基础。

Expression of human flt3 ligand andthrombopoietin genes in a bone marrow stromal cell line by internal ribosome entry site(IRES)sequence

ZHANG Yi, TANG Peixuan, LI Xiusen, et al.

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