我们介绍运用聚合酶链反应(PCR)结合限制性内切酶Taq Ⅰ酶切分析方法研究凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因热点突变，首次在国内发现1例血友病A基因热点突变，现报道如下。

病例和方法

1 病例资料 患者，男，3岁。平时有鼻衄、撞后出血不止等症状。1年前因唇外伤后出血不止来我院诊治。家族中无类似病病史。主要实验室检查：CT 10分钟，BT 6.5分钟，KPTT 93.2秒，FⅧ∶C 2%(一期法)，FⅧ∶Ag?%(放免法)。

    2 基因组DNA抽提 按本室常规抽提外周血白细胞基因组DNA。

    3 聚合酶链反应(PCR)

    3.1 引物：用于PCR扩增FⅧ基因24号外显子的引物序列为：

    pA7:5′-TTGAGGTTGCAGCATGCCAT-3′

    pA8:5′-CTGAGGTCTCCAGGCATTAC-3′

    以上引物由法国巴黎Bicetre医院Meyer教授惠赠 ......