关键词：
P物质(SP)是一种具有广泛生物活性的脑肠肽激素，具有促进胃肠平滑肌收缩的作用，但对胃肌电作用的报道甚少。胃电节律失常在临床上十分常见，与胃运动障碍密切相关，临床上多见于功能性消化不良、胃轻瘫等。但其发病机理尚不明确。本实验探讨SP在胃电节律失常发生中的作用，为临床疾病防治提供依据。
材料与方法
一、研究对象
健康成年Wistar大鼠60只，体重220～250g，雌雄各半，随机分组：(1) 正常对照组：15只，正常喂养。(2) 模型组：15只，按我室[1] 设计方法饲养4周，即逢单日禁食，逢双日进食，饮水不限。(3) SP组：10只，按模型组方法喂养4周，每逢禁食日腹腔注射SP 25μg/kg,每天2次。(4) SP受体拮抗剂(SP-ra)组：10只，正常喂养，腹腔注射SP-ra 5 μg/kg,每天2次，共4周。(6) 药物组：10只，正常喂养，注射各种药物观察胃电变化。
二、研究内容与方法
胃肌电记录方法：动物麻醉后，剖开腹壁，在距幽门0.5cm处胃窦浆膜下埋植电极，两电极间距0.3cm，导线经皮下由颈后引出，术后5日记录胃电。计算慢波、快波的频率和异常节律指数。异常节律指数指节律异常的时间占记录总时间的百分比。药物组记录腹腔注射SP、SP-ra、阿托品后胃电变化。
胃窦肌间神经丛的铺片：大鼠用4%多聚甲醛-磷酸缓冲液内固定后，于4°C下在该液中固定8～12小时，将胃窦剪成0.4×0.2cm组织块，置4°C 20%蔗糖-磷酸缓冲液6～8小时，用钟表镊尖轻轻刮去粘膜及剥去粘膜下层，置4°C 30%蔗糖-磷酸缓冲液中8～12小时，挑去斜肌层和环肌层，即得到附于纵肌层之上的肌间神经丛[2] 。
胃窦肌间神经丛的染色：免疫组织化学法显示SP免疫反应阳性(SP-IR)神经，Kamovsky-Boot's直接法[3] 显示乙酰胆硷酯酶(AchE)神经，并分别用图像分析系统定量。
结 果
一、胃肌电参数
正常大鼠胃肌电慢波频率平均4.56±0.63次/分，快波频率平均2.05±0.49簇/分。模型组慢波频率降低，节律紊乱明显，快波受到明显抑制。SP组慢波及快波频率均明显高于模型组，异常节律指数均有明显改善。详见表1。药物组：SP可使胃肌电快波发放明显增多，SP-ra使快波明显减少。阿托品可引起胃电节律失常增多及快、慢波频率明显降低。详见表2。
二、肌间神经丛AchE、SP-IR神经分布及定量
AchE、SP-IR神经均呈“网”状分布，可见粗大的神经节及散在的神经元胞体，神经纤维交织成网。但SP-IR神经纤维要细小，其神经元胞体稀少。定量分析显示模型组及SP-ra组AchE神经密度明显低于正常组，SP组明显高于模型组。模型组SP-IR神经密度明显低于正常组，SP-ra组与正常组差异无显著性，SP组与模型组差异无显著性。详见表3。
三、相关分析
相关分析结果显示：模型组大鼠胃窦肌间神经丛的AchE与SP-IR神经密度呈显著正相关(r=0.086,P<0.01)。
表1 各组大鼠胃肌电测定结果
| 组别 | 鼠数 | 慢波频率 (次/分) | 快波频率 (簇/分) | 异常节律 指数(%) |
| 正常对照组 | 15 | 4.56±0.63 | 2.05±0.49 | 1.67±0.78 |
| 模型组 | 15 | 3.04±0.52** | 1.45±0.57** | 31.33±9.13** |
| SP组 | 10 | 4.27±0.52△△ | 2.32±0.25△△ | 1.32±0.48△△ |
| SP-ra组 | 10 | 3.99±0.57* | 1.24±0.16** | 1.84±0.62 |
表2 药物对大鼠胃肌电的作用
| 药物 | 鼠数 | 慢波频率 (次/分) | 快波频率 (簇/分) | 异常节律 指数(%) |
| 正常 | 15 | 4.56±0.63 | 2.05±0.49 | 1.67±0.78 |
| SP | 10 | 4.52±0.62 | 2.59±0.18 | 1.95±0.32 |
| SP-ra | 10 | 4.01±0.65* | 1.04±0.42** | 1.86±0.86 |
| 阿托品 | 10 | 2.78±0.74** | 1.08±0.46** | 2.82±0.18** |
| 阿托品+SP | 10 | 3.44±0.62**##△△ | 1.54±0.52*##△ | 2.21±0.62△△ |
| SP-ra+SP | 10 | 4.27±0.68 | 1.25±0.38 | 1.87±0.52 |
与阿托品比：△ P<0.05，△△ P<0.01
表3 大鼠胃窦肌间神经丛AchE、SP-IR神经含量(密度%)
| 组别 | 鼠数 | AchE | SP-IR |
| 正常对照组 | 15 | 13.02±1.87 | 4.15±0.84 |
| 模型组 | 15 | 10.80±1.71 | 2.81±0.91 |
| SP组 | 10 | 13.69±1.76△△ | 3.18±0.86△△ |
| SP-ra | 10 | 11.16±1.45* | 4.27±0.87 |
讨论
一、尽管肠肌间神经丛铺片技术早已成熟，但胃窦部肌层肥厚，有内斜、中环和外纵的特异结构，使胃窦部肌间神经丛剥离十分困难，至今在国内未见胃窦肌间神经丛铺片成功的报道。以往只能用胃窦常规切片的方法，从一个侧切面反映肌间神经丛的分布及含量，有其局限性，限制了胃肌间神经丛研究的深入及发展。
本室经过摸索，结合胃的结构特点，参考肠肌间神经丛铺片方法，将标本放入不同浓度的蔗糖液及不同时间的脱水处理，分次剥离各层组织，成功地建立了一整套胃窦肌间神经丛铺片方法，国内首次制作出十分清晰的胃窦肌间神经丛铺片，为胃肌间神经丛的深入研究开创了十分有利的条件。
二、SP对胃肌电节律失常的作用
胆硷能神经为ENS中的经典神经，乙酰胆硷(Ach)是胃肠道最主要的兴奋性神经递质。本实验结果显示：正常大鼠注射阿托品后可引起胃电节律失常，模型组大鼠胃电节律失常时，胃窦肌间神经丛Ach神经含量明显减少，提示AchE神经对维持正常胃肌电节律有重要作用。这与文献报道[4] 一致。
本实验结果还显示：胃电节律失常大鼠胃窦肌间神经丛内SP神经明显减少，而给于SP可使节律正常化，提示SP与胃电节律正常化密切相关。早有文献报道SP可兴奋AchE神经，促进Ach释放。本实验也发现模型组大鼠肌间神经丛AchE和SP-IR神经均有明显下降，且两者含量呈显著正相关。给于SP后胃电节律失常好转，AchE神经也有明显增加。给予SP-ra可使AchE神经明显减少。药物组中如应用阿托品后给予SP，则SP无明显纠正胃电节律失常的作用。因此我们结论：SP是通过兴奋AchE神经使胃电节律正常化的。
三、SP可促使快波发放
SP除对AchE神经有兴奋作用外，对胃肠平滑肌有直接作用。可阻滞钾离子通道，激活钙离子通道，降低膜电位阈值，峰电位发放增加。本实验也可见，模型组大鼠快波频率仅1.45，SP组高达2.32，超过正常的2.05。在药物组，注射SP后快波频率高达2.59，证实SP有促使快波发放的作用。给正常大鼠注射SP-ra后，快波明显减少，胃电节律无明显改变，提示在正常大鼠SP对维持快波发放有重要作用。
参考文献
1.黄茂涛，王振华，陈代陆.氮能神经在大鼠胃电节律失常中作用的研究.中华消化杂志，1997，17：增刊61-62.
2.李魏，王正品，周德山，等.小肠铺片PAP染色的体会.第三军医大学学报，1990，12：224-225.
3.艾民康.神经介质及其有关酶类的组织化学.人民卫生出版社，1987：118-120.
4.Gullikson GW, Okuda H, Shimaziu M, et al. Electrical arrhythmias in gastric antrum of the dog. Am J Physiol,1980,239:G56-68.
(收稿：1998-03-17) , 百拇医药