糖尿病大鼠肾脏一氧化氮的动态变化
关键词:
一氧化氮(NO)亦称内皮源性舒张因子(EDRF),其代谢异常所致内皮源性舒张功能障碍在糖尿病肾病(DN)的发病中起重要作用。目前对糖尿病(DM)内源性NO的变化研究,大多局限于糖尿病的某一时期,而对其动态变化研究较少。本实验通过观察链脲佐菌素(STZ)诱导的DM大鼠不同病程肾组织NO含量和一氧化氮合酶(NOS)活性变化,同时观察肾组织NO水平与肾小球滤过率(GFR)和肾组织形态学关系,探讨DM大鼠肾脏NO变化的规律和意义。
一、材料和方法
1.材料:健康雄性SD大鼠60只,体重在150~200g之间,随机分为DM组和对照组(NC),禁食12小时后DM组一次性腹腔注射STZ65mg/kg(美国Sigma公司生产,用0.1mol/L pH 4.5的柠檬酸缓冲液配成2%的溶液),3天后选择尿糖强阳性、血糖≥16.7mmol/L者为DM大鼠。对照组注射相同体积柠檬酸缓冲液。
2.方法:于DM形成后2、8、16周,两组各取相同例数动物,收集24小时尿,麻醉后采静脉血,分别测定血糖(葡萄糖氧化酶法),血肌酐(Scr)和尿肌酐(Ucr)(常规生化法),并计算内生肌酐清除率(Ccr),以Ccr代表GFR。然后取双肾,右肾称重后于液氮中速冻保存,备测肾组织NO含量和NOS活性,NO含量用Griess重氮化反应法〔1〕 测定,其原理为NO- 2 与磺酸及萘乙烯二胺盐酸盐反应生成粉红色偶氮化合物 ......
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