醛糖还原酶cDNA转染的CHO细胞株的建立及其基因表达与生化特性
醛糖还原酶|转染|糖尿病并发症,关键词:
关键词:醛糖还原酶;转染;糖尿病并发症
【摘要】 目的 建立一内含人醛糖还原酶(hAR)cDNA的细胞株,并研究其在高葡萄糖环境中的基因表达及生化特性。方法 将全长hARcDNA基因插入质粒载体pcDNAneo中,并将AR正义、反义构建以及pcDNAneo载体本身分别转染至中华仓鼠卵巢(CHO)细胞中。用放免法测定这些细胞株在高糖环境中的山梨醇水平。用Northern杂交检测其mRNA表达,并用分光光度法检测AR活性。结果 有四株AR正义构建的细胞株显示了高山梨醇水平。随机将其中一株细胞作进一步分析,发现该细胞株具有ARmRNA表达,并且在高糖环境中AR活性亦显著升高。以上升高的山梨醇及酶活性均被AR抑制剂-HOE843所抑制。结论 本研究结果表明已成功地建立了一细胞系统,它为进一步研究AR在糖尿病并发症发病机理中的作用提供了手段。
The establishment of CHOcell line transfected with aldose reductase cDNA, its gene expression and biochemicalcharacters
......
您现在查看是摘要页,全文长 11043 字符。