碱性成纤维细胞生长因子对局部脑缺血再灌注后p53基因表达及细胞凋亡的影响
关键词:
90年代国内外运用基因工程方法获得的重组外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),神经活性广泛,能保护神经元、促进神经生长,是一种具有多种生物学活性的多肽生长因子。为探讨其抗缺血性脑损伤的作用,我们于1997年9月至1999年3月进行了有关bFGF对脑缺血再灌注后p53基因表达及细胞凋亡影响的实验研究。
一、材料与方法
健康雄性Wistar大鼠96只,体重250~300g,3月龄。分为正常组、假手术组及缺血再灌注组。缺血再灌注组又分为bFGF组和生理盐水组,并根据不同时间点分为缺血2h再灌注0、 1、6、12、24、48、72 h组,每组各6只大鼠。
1.模型的制作:采用线栓法制成大鼠大脑中动脉闭塞及再灌注模型。bFGF组在缺血后30min〔1〕 ,从右侧侧脑室注射含bFGF(美国Sigma公司)1.2 μg的生理盐水10μl;生理盐水组注射10 μl生理盐水。
2.p53免疫组化、原位杂交及凋亡细胞的染色:10%水合氯醛麻醉后,快速开胸暴露心脏,升主动脉插管,快速灌注37℃生理盐水150ml,再灌注4℃、4%多聚甲醛磷酸缓冲液500 ml。取大鼠脑组织常规石蜡包埋 ......
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