利用穿梭质粒快速构建含乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因的重组杆状病毒
杆状病毒|蛋白表达|乙型肝炎病毒表面抗原,关键词:
关键词:杆状病毒;蛋白表达;乙型肝炎病毒表面抗原
【摘要】 目的 应用新型杆状病毒表达系统快速构建含有HBsAg基因的重组杆状病毒,高效表达HBsAg,为HBV诊断试剂、疫苗及治疗研究提供依据。方法 构建含有HBsAg基因的供体质粒pFB-BS,转化Bac-to-Bac杆状病毒表达试剂盒中的DH10Bac致敏菌,利用其含有的细菌Tn7转座系统将HBsAg基因重组至穿梭质粒Bacmid上,快速筛选出含有HBsAg基因的重组杆状病毒。结果 此重组病毒能在昆虫细胞中表达出有生物学活性的HBsAg,表达产物主要集中在细胞内,ELISA滴度为1:2×10 4 ,产量可以达到2μg/106 细胞。结论 此系统的成功应用为真核表达工作提供新的工具。
Rapid construction of recombinant baculovirus carrying hepatitis B virus surface antigen gene by using a novel baculovirus shuttle vector(Bacmid) Miao Ji, Cong Xu, Tan Wenjie, et al. Department of Hepatitis, Institute of Virology, Chinese Academy of Preventive Medicine, Beijing 100052
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