人类免疫缺陷病毒Ⅰ型包膜糖蛋白gp41的基因重组表达
HIV-1|基因重组|gp41|免疫检测试剂,关键词:
关键词:HIV-1;基因重组;gp41;免疫检测试剂
【摘要】 目的 基因重组表达(HIV-1 gp41)抗原,并研制一种快速、简便、灵敏性高、特异性强的国产HIV-1免疫检测试剂。方法 选用HIV-1型BH10毒株的包膜糖蛋白gp41的部分基因(6977-7497),重组在PBV221表达载体上。表达产物通过15%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳初步分离纯化,根据RF值,切下含特异蛋白的胶带,以Western blot法转移在硝酸纤维素膜上;免疫血清法检测合格者制备的抗原检测条带,经国家标准参比血清检测。结果 获得1株含HIV-1 gp41基因的重组质粒,其蛋白的特异性表达为8%,经HIV-1阳性血清检测和国家标准参比血清检定,该表达蛋白灵敏性、特异性均为100%。结论 (1)可以选用单一的gp41作为HIV-1感染初筛试剂的抗原。(2)表达载体PBV221其表达的目的蛋白为非融合蛋白,作为试剂中的抗原,可降低检测中的非特异性 ......
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