人免疫缺陷病毒Ⅰ型包膜糖蛋白gp120基因在大肠杆菌中的高效表达
人免疫缺陷病毒Ⅰ型|gp120|载体|基因表达,关键词:
关键词:人免疫缺陷病毒Ⅰ型;gp120;载体;基因表达
【摘要】 目的 提高人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)包膜糖蛋白gp120基因在原核系统中的表达量。方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增出560bp的HIV-1 LAV株gp120N端基因片段,经EcoR?Ⅰ及Sal?Ⅰ酶切后插入高效表达载体pET28a,得到重组质粒pET/120,并转化表达宿主菌BL21(DE3),经诱导高效表达出HIV-1 gp120基因片段。结果 间接酶联免疫吸附试验(ELISA)及Western blot实验表明,表达产物具有良好的抗原性及特异性。SDS-PAGE电泳分析结果表明,gp120表达量占总菌体蛋白的50%。结论 在原核系统中高效表达了HIV-1gp120基因。
High-level expression of human immunodeficiency virus type 1 gp120 protein in E.coli Bi Lan,Lei Xiaojun,Zhu Jiahong,et al.Wuhan Institute of Biological Products,The Ministry of Health,Wuhan 430060
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