反义核酸逆转人白血病多药耐药细胞株耐药性的实验研究
寡核苷酸类,反义|抗药性,多药|白血病,关键词:,Reversalofmultidrugresistanceofleukemiacelllineinvitrobyantisensephosphorothioateoligonucleotide
关键词:寡核苷酸类,反义;抗药性,多药;白血病
【摘要】 目的 采用一段人工合成的互补于多药耐药基因(mdr1 基因)的反义硫代磷酸寡核苷酸(AS-SODN,反义核酸)转染白血病多药耐药细胞株K562/ADM(耐阿霉素的K562细胞株),来逆转白血病细胞的多药耐药。方法 四唑蓝快速比色法(MTT法)检测K562/ADM细胞对阿霉素的半数抑制量(IC50 ),流式细胞仪分析细胞内的柔红霉素含量,免疫细胞化学染色方法确定P170的表达水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mdr1 -mRNA的相对水平(mdr1 与β2 微球蛋白之比,mdr1 /β2 -MG)。结果 浓度为2μmol/L的反义核酸使K562/ADM细胞对阿霉素的IC50 从处理前的25.72mg/L降至处理后的6.97 mg/L,相对逆转效率为73.01%。反义核酸亦使K562/ADM细胞内的柔红霉素含量增加。P170表达阳性率从处理前的(98.26±1.35)%降至处理后的(18.3±6.5)%,mdr1 /β2 -MG亦由处理前的2.07±0.16降至1.57±0.14,mdr1 -mRNA相对水平有所下降 ......
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