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关键词：
我们采用免疫组化方法，研究门脉高压患者脾动、静脉壁诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的表达，旨在探讨NO与门脉高压症内脏血管病理性损伤的关系。
一、材料和方法
1. 临床资料：1995年1月～1997年6月在本院外科治疗的门脉高压症患者21例，男14例，女7例。年龄38～55岁。均行脾切除术加贲门周围血管离断术。术后病检证实为肝炎后肝硬化17例，血吸虫性肝硬化4例。对照组为外伤性脾破裂患者，共15例，行单纯脾切除术，男10例，女5例，年龄18～48岁。
2. 实验方法
①标本取材和处理：二组患者行脾切除术后在脾门处游离出脾动、静脉各一段经固定、脱水和石腊包埋，连续切片。分别H.E染、弹力纤维染色(weigert氏染色法)和iNOS免疫组化染色。
②iNOS免疫组化染色：采用S-P免疫组化法。第一抗体为单克隆鼠抗人iNOS抗血清，由北京中山生物技术有限公司提供。按S-P试剂盒说明书进行，DAB显色，以胞浆内出现棕色颗粒为阳性染色。同时设空白对照和替代对照，均为阴性。
③免疫组化定量测定和统计学处理：用同济医科大学产医用图像处理系统(TJTY-300)，在40倍物镜下每张切片随机选取4个视野，计算其iNOS平均光密度值(OD)。采用SAS软件统计包进行t检验。
二、结果
1. H.E和弹力纤维染色：正常脾动、静脉可见完整的内膜和内弹力板，门脉高压症患者脾动、静脉壁发生明显改变。脾静脉内膜有结节性斑块及弥漫性增厚；中膜显著增厚，平滑肌细胞肥大、增生，细胞外基质增多，部分内弹力板拉直断裂。脾动脉管壁增厚，部分内弹力板拉直、断裂、平滑肌细胞增生、肥大，细胞外基质增多。
2. iNOS免疫组化：正常脾动、静脉壁iNOS为阴性或弱阳性。门脉高压症患者则呈阳性或强阳性。位于血管平滑肌细胞的胞浆内。二组病人iNOS光密度值差异有非常显著性(P<0.01)(附表)
三、讨论
门脉高压症属于血管性疾病，内脏血管的病理变化影响血管的舒缩功能，从而对门脉血流动力学产生不利影响，同时内脏的血液供应亦发生变化。内脏血管的形态学变化可能是门脉压力增高和内脏血流量增多所引起，是一种适应性的结构改变。本实验发现，门脉高压症患者脾动、静脉壁iNOS活性显著增强，从而表明NO合成增加，NO可能与内脏血管的病理变化有关。已知NO在细胞与细胞信息传递、血管舒张、免疫及细胞毒性中起重要作用 [1] 。我们认为NO增多具有以下作用：①内脏血管扩张：门脉高压症时，内脏血管的平滑肌细胞iNOS活性增强，故合成大量NO。NO通过自分泌、旁分泌和胞内分泌系统与平滑肌内的受体结合，活化鸟苷酸环化酶，激活的酶使三磷酸鸟苷(GTP)转变为环磷酸鸟苷(cGMP)。当后者升高时，细胞内钙增多，影响 Na+ -Ca2+ 交换，使VSM松弛，血管扩张。静脉系统扩张可导致门体交通支形成，并降低门脉压力，故是机体的一种代偿性机制。动脉系统扩张，则降低对缩血管物质的反应性、使外周阻力下降、心输出量增多，从而形成内脏高动力循环。②血管壁损伤：iNOS合成的NO与免疫和细胞毒性有关 [1] ，因而损伤血管的内膜、内弹力板和平滑肌细胞等。内膜损伤可促使血小板聚积并形成附壁血栓。内弹力板损伤后可断裂，从而影响血管的弹性。血管壁损伤可继发细胞外基质的变化，使胶原、弹性蛋白和氨基葡聚糖的量增加以致基质扩充、并有炎性细胞浸润。故血管壁增厚、变硬、弹性下降。内脏动脉血管壁的病理性损伤降低动脉血管对缩血管物质的反应性。静脉壁的弹性下降则使静脉血流阻力增，导致门脉压力增高。
参 考 文 献
1 王根生，刘耕陶. 一氧化氮在小鼠肝损伤中的作用. 中华医学杂志，1996,76(3): 203-206.
附表 门脉高压症患者和外伤性脾破裂患者脾动、静脉壁iNOS光密度值(±s)
| 组别 | n(例数) | 脾动脉 | 脾静脉 |
| 门脉高压症组 | 15 | 91.28±24.15** | 85.67±21.75** |
| 外伤性脾破裂组 | 10 | 24.61± 4.15 | 18.42± 1.89 |
(收稿：1997-10-21 修回：1998-03-02)
(本文编辑：袁平戈 校对：袁平戈) , 百拇医药