反义寡核苷酸对H1δ9细胞中丁型肝炎病毒基因复制与表达的抑制作用
寡核苷酸,反义丁型肝炎病毒硫代修饰H1d9细胞,关键词:
关键词:寡核苷酸,反义 丁型肝炎病毒 硫代修饰 H1d9细胞
摘要 目的 在H1 d9 细胞中观察反义寡核苷酸(ASODN)及其硫代修饰物(S-ASODN)对丁型肝炎病毒(HDV)基因复制与表达的抑制作用。方法 在分子水平证实互补于HDV基因链核酶自裂位点和stemⅠ区的ASODN可抑制核酶自裂的基础上,进一步合成针对该区684~698位核苷酸的15聚ASODN及S-ASODN,在培养的H1 d9 细胞中加入不同寡核苷酸,分别采用ELISA和斑点杂交法检测上清中HDAg及细胞中的HDVcDNA。结果 加入终浓度为6 mmol/L的S-ASODN后24h H1d9细胞中HDVRNA复制及HDAg分泌均受抑制,抑制率分别为84.5%和76.14%。S-ASODN的终浓度为2、4、6 mmol/L时,其抑制作用呈剂量依赖关系。在同等剂量时,ASODN与S-ASODN抑制作用相近 ......
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