携带反义c-myc的重组腺病毒安全性研究
重组腺病毒载体|反义c-myc|安全性|基因治疗,关键词:
关键词:重组腺病毒载体;反义c-myc;安全性;基因治疗
【摘要 】 目的 研究携带反义c-myc的重组腺病毒(Ad-ASmyc)潜在的副作用,评价其安全性,为其进一步进入临床试验提供依据。方法 用Ad-ASmyc感染HeLa细胞,制备细胞提取液后反复两次感染HeLa细胞,观察Ad-ASmyc的繁殖、扩增,以及对HeLa细胞的作用,RT-PCR检测其DNA的转录;确定Ad-ASmyc对作为正常细胞的人胚肺二倍体细胞2BS的感染能力,绘制细胞生长曲线,观察Ad-ASmyc对正常细胞的毒性;给Balb/c小鼠腹腔注射重组腺病毒后,每日观察一般状况,化验肝、肾功能,PCR检测Ad-ASmyc在重要脏器中的分布,显微镜观察重要脏器的病理学变化。结果 Ad-ASmyc是一复制缺陷型腺病毒,它能高效感染2BS细胞,但并不影响其生长,小鼠体内应用后,无急性毒性症状发生,在肝、肾、胃、脾内可检测到腺病毒的分布。但在注射109 pfu第6天、第12天的小鼠肝组织内可观察到轻微炎症 ......
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