大鼠间质胶原酶哺乳动物表达质粒的构建和体外转基因表达
胶原酶大鼠体外转染,关键词：
关键词：胶原酶 大鼠 体外转染
【摘要 】 目的 构建大鼠间质胶原酶哺乳动物细胞表达质粒并进行体外转基因研究。方法 采用PCR及基因重组技术构建融合有Flag多肽的大鼠间质胶原酶哺乳动物表达质粒，用脂质体介导该表达质粒体外转染培养的NIH3T3细胞，通过RT-PCR方法在转染细胞中检测间质胶原酶融合蛋白的mRNA表达，采用westernblot方法在转染细胞的培养上清液中检测间质胶原酶融合蛋白的分泌，采用明胶酶谱法检测表达的间质胶原酶的明胶降解活性。结果 构建的融合Flag的大鼠间质胶原酶哺乳动物表达质粒经脂质体介导体外转染NIH3T3细胞后能够转录、表达并分泌间质胶原酶融合蛋白，并且，这一表达产物具有降解明胶的酶活性。结论 我们成功构建了融合Flag的大鼠间质胶原酶哺乳动物细胞表达质粒，体外转染研究证实该质粒能够在NIH3T3细胞中表达活性间质胶原酶，为进一步运用该质粒进行体内转基因等研究奠定了基础。
Construction ofmammalian expression plasmid of Flag-tagged rat collagenase and its in vitro transfectionstudy
GUO Jinsheng, WANG Jiyao.
......
您现在查看是摘要页，全文长 11398 字符。