 |
关键词：
严重烧伤病人水肿液在机体烧伤后发生的病理过程中起重要作用，痂下水肿液(STF)是烧伤水肿液中的重要部分。有研究表明STF中内毒素等水平较高[1] ，STF在体外可抑制淋巴细胞的增殖反应[2] 。TNFα、IL-6和IL-8作为重要的细胞因子，在STF中其含量报道甚少。我们利用烧伤豚鼠模型，观察STF和烧伤血浆中TNFα、IL-6和IL-8变化，以进一步阐明STF的作用。
1 材料与方法
1.1 痂下水肿液的收集
48只豚鼠，体重(250±20)g(第一军医大学动物所提供)，随机分为烧伤组(40只)和非烧伤组(8只)。烧伤组动物背部脱毛，3%戊巴比妥钠(0.2 ml/kg)腹腔注射麻醉，置100℃沸水水浴锅中12秒，造成背部30%体表面积Ⅲ度烧伤(经病理检查证实)，伤后即予4 ml/100g体重生理盐水腹部皮下注射抗休克。分别在8，16，24，48和72 h 5个时相点在戊巴比妥钠麻醉下，行背部Ⅲ度创面切痂术，术中用无菌注射器收集STF。切痂后剖腹采取腹主动脉血(2 ml)并活杀。未烧伤组不烫伤，余处理同烧伤组。STF和血标本均立即放入预冷的含有肝素抗凝液(200μl)的试管中混匀，随即在4℃条件下离心20 min，抽取STF和血浆，置于-70℃冰箱中保存。
1.2 检测指标及方法
STF中TNFα、IL-6和IL-8均采用ELISA双抗体夹心法检测，TNFα ELISA检测盒由军事医学科学院分子免疫室提供。IL-6和IL-8 ELISA检测盒购于第四军医大学免疫教研室。
1.3 统计学处理
结果以均值±标准差()表示，组间数据采用两样本均数t检验。
2 结果
30%Ⅲ度烧伤豚鼠于伤后8 h烧伤血浆中TNFα和IL-6水平迅速升高，伤后16 h达峰值，并维持于此高水平至伤后72 h；痂下水肿液中TNFα和IL-6较烧伤血浆中TNFα和IL-6升高更明显，也于伤后16 h达峰值。痂下水肿液及烧伤血浆IL-8于伤后8 h内已明显升高，但IL-8在伤后72 h内呈逐渐上升趋势。在各相同时相点，痂下水肿液中TNFα、IL-6和IL-8分别较烧伤血浆中TNFα、IL-6和IL-8含量有非常显著增高(表1)
表1 豚鼠烧伤血浆和STF中TNFα(ng/ml)、IL-6(pg/ml)、IL-8(pg/ml)含量比较
Tab 1 TNFα(ng/ml)、IL-6(pg/ml)、IL-8(pg/ml)in STF and plasma of burned guinea pigs
| 检测项目 | 伤 前 | 伤后时间(h) | |||||
| 8 | 16 | 24 | 48 | 72 | |||
| 血浆 | TNFα | 0.13±0.04 | 0.26±0.09 | 0.38±0.07 | 0.28±0.05 | 0.27±0.06 | 0.23±0.08 |
| IL-6 | <100 | 431.18±52.75 | 626.32±195.81 | 531.65±154.84 | 307.29±93.46 | 275.07±81.62 | |
| IL-8 | <156 | 293.46±92.10 | 340.16±86.47 | 418.60±67.53 | 585.33±97.64 | 671.72±127.54 | |
| STF | TNFα | 0.93±0.11* | 1.04±0.12* | 0.97±0.08* | 0.75±0.10* | 0.62±0.09 | |
| IL-6 | 710.35±116.49* | 1084.52±264.61* | 853.72±219.96* | 569.10±157.80* | 419.26±105.58* | ||
| IL-8 | 318.32±82.71* | 482.67±116.11* | 597.13±88.91* | 680.65±157.42* | 813.54±252.70* | ||
分别与同时相点血浆中TNFα、IL-6、IL-8比较：* P<0.01
3 讨论
严重烧伤后，由于应激因素、坏死组织毒素吸收和细菌感染，均可刺激单核巨噬细胞等释放TNFα以及刺激单核巨噬细胞、内皮细胞等合成和分泌IL-6、IL-8。有研究报道严重烧伤后血浆中TNFα、IL-6和IL-8增高[3] ，并在烧伤后病理生理改变中起重要作用。我们的实验也证实30%Ⅲ度烧伤豚鼠烧伤后血浆中上述三个因子在伤后72 h内持续增高。并发现痂下水肿液中TNFα、IL-6和IL-8亦增高，明显高于相应伤后时相点烧伤血浆中含量，而且痂下水肿液和伤后血浆中TNFα、IL-6和IL-8各自变化趋势一致，有明显相关性。因此，我们推测痂下水肿液中高浓度的TNFα、IL-6和IL-8，是血浆内三种因子异常增高的重要来源，痂下水肿液可能是烧伤后一些细胞因子的重要“储存库”。随着水肿液的回吸收，高浓度的TNFα、IL-6和IL-8进入全身血液循环，在伤后机体的全身炎症反应中必将发挥重要作用。要减少TNFα、IL-6和IL-8在全身炎症反应中的作用，应尽早清除痂下水肿液。这一研究为临床早期大面积切痂清除大量坏死组织和痂下水肿液可明显改善病人全身炎症反应和器官功能损害[4] 提供了理论依据。
STF中TNFα、IL- 6和IL-8明显高于烧伤后血浆中水平，可能与伤后单核巨噬细胞及有关的刺激因子在烧伤痂下水肿液局部聚集和创面、痂下水肿液周围的内皮细胞等受激或受损有关，有待进一步研究。
参考文献
1 杨磊，周一平.烫伤豚鼠早期痂下水肿液内毒素水平的研究.中华整形烧伤外科杂志，1997，13：421-423.
2 Ferrara JJ,Dyess DL,Luterman A,et al.The suppressive effect of subeschar tissue fluid upon in vitro cell mediated immunologic function.J Burn Care Rehabil,1988,9:584-588.
3 郭振荣，盛志勇，高维谊，等.大面积烧伤休克期切痂对抗感染的影响.解放军医学杂志，1997，22：54-56.
4 Zhou YP.Extensive escharectomy in septicema of burns:Analysis of 32 cases.Burns,1984,10:200-203.
(收稿：1997-12-20)
, http://www.100md.com