检测人端粒酶活性的端粒酶TRAP-ELISA法的建立
端粒酶,分析|聚合酶链反应|酶联免疫吸附测定|端粒重复序列扩增法,关键词:
关键词:端粒酶/分析;聚合酶链反应;酶联免疫吸附测定;端粒重复序列扩增法
【摘要 】 目的 为改进端粒重复序列扩增法 (TRAP)存在定量困难、应用同位素及每次检测标本数受限等缺点,研究建立及评价端粒酶 TRAP-ELISA法。方法 端粒酶 TRAP-ELISA法是将 TRAP与 PCR-ELISA系统结合。与常规 TRAP法相比较,应用端粒酶 TRAP-ELISA法检测端粒酶阳性的 293细胞和阴性对照标本 (加热或 RNase 处理和正常人内皮细胞 )。结果 293细胞端粒酶阳性,对 10, 102 , 103 及 104 个细胞检测均为阳性,所测到的吸光度值 (A,曾称光密度 OD)依赖于被检 293细胞数。 RNase或加热处理标本和正常人内皮细胞均阴性。该方法可在当日观察结果,不需放射性同位素。结论 端粒酶 TRAP-ELISA是一种非放射性同位素、快速及可定量的人端粒酶活性检测方法 ......
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