蛋白激酶C信号途径在过敏性气道炎症大鼠淋巴细胞激活机制中作用的研究
关键词:
我们应用蛋白激酶C(PKC)兴奋剂和阻断剂,观察卵蛋白致敏大鼠的支气管肺泡灌洗液中的淋巴细胞增殖及其白细胞介素5(IL-5)mRNA表达与PKC信号传导通路间的关系,以对淋巴细胞功能异常的分子机制中PKC信号传导机制的作用进行探讨。
材料与方法 主要试剂与药品:RPMI-1640、胎牛血清(Fbs)均为美国Gibco公司产品,PKC兴奋剂卟啉醇肉豆蔻酸乙酸[PMA(phorbol12-myristate 13-acetate)] 及特异性PKC阻断剂 RO-318220 均由美国LC laboratory提供,IL-5 cDNA质粒由英国国际心肺中心孙英博士惠赠,百日咳杆菌疫苗由武汉生物制品研究所提供,氢氧化铅[Al(OH)3 ]为上海金山化工厂产品,卵蛋白(OVA)为美国Sigma公司产品, 地高辛标记试剂盒为德国Boehringermanheims产品。
动物模型制备:雄性SD大鼠20只, 体重(180±50)g,由同济医科大学实验动物中心提供,随机分为两组。正常对照组(A组)10只,以生理盐水代替抗原进行注射, 致敏组(B组)10只,按我们以往所用方法[1] 给予OVA致敏和刺激,于生理盐水和OVA免疫2周后行支气管切开插管术, 用RPMI-1640液进行支气管肺泡灌洗液的淋巴细胞分离培养 ......
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