99mTc标记c-myc mRNA反义寡核苷酸探针
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关键词:寡核苷酸探针;寡核苷酸类;反义;RNA;信使;锝
【摘要】 目的 建立99m Tc标记反义寡核苷酸(oligonucleotide,简称oligo)的方法。方法 将联肼尼克酰胺衍生物偶联到人工合成的15mer c-myc mRNA反义oligo末端连接的氨基上,以三羟甲基甘氨酸做协同配体进行99m Tc标记,用Sep-Pak反相柱纯化99m Tc-oligo,并评价其特性。结果 标记率为60%~80%,纯化后99m Tc-oligo的放化纯度在室温4小时内保持>95%,比活度在5~42MBq/μg范围。对照组标记到oligo上的放射性<5%。99m Tc-oligo在新鲜人血清中稳定,不被核酸酶降解,也不与血清中蛋白质结合,打点杂交证实99m Tc标记的反义探针探测其靶序列(正义链)DNA的最大可探测灵敏度为30nmol/L。结论 制备的99m Tc标记反义oligo探针具有良好的稳定性和杂交反应特性 ......
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