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编号:10647036
转录因子LAP反式激活α1(I)胶原基因在肝脏星状细胞中的表达
http://www.100md.com 《中国普外基础与临床杂志》 2000年第2期
转录因子|肝脏激活蛋白|α1(I)基因调控|肝脏星状细胞,关键词:
转录因子LAP反式激活α1(I)胶原基因在肝脏星状细胞中的表达
转录因子LAP反式激活α1(I)胶原基因在肝脏星状细胞中的表达

     刘小菁 华西医科大学附属第一医院内科 成都 610041 中国普外基础与临床杂志 2000 0 7 2


    关键词:转录因子;肝脏激活蛋白;α1 (I)基因调控;肝脏星状细胞 期刊 zgpwjcylczz 0 79-82 基础与实验研究 fur -->


    

【摘要】目的 了解激活的肝脏星状细胞(hepaticstellate cell, HSC)中一种肝脏组织特异的转录因子肝脏激活蛋白(liveractivator protein, LAP)在α1 (I)基因表达调控中的作用。方法 采用链霉蛋白酶、胶原酶原位灌注、Nycodenz密度梯度离心分离大鼠HSC,并进行体外培养使之活化。构建含人α1 (I)胶原基因启动子片段(-804~+1452或-804~+222碱基)的荧光素酶报告基因质粒。用构建的报告基因质粒与LAP表达质粒一起,用阳离子脂质体介导的方法,瞬时共转染激活的HSC细胞。α1 (I)基因启动子的活性通过测定荧光素酶活性来确定。结果 构建的含α1 (I)基因第一内含子片段的荧光素酶报告基因(PGL3-col)比不含α1 (I)基因第一内含子的报告基因〔PGL3-col(△intron)〕在HSC中有较强的表达(荧光素酶活性为315±45U/mg蛋白与220±70 U/mg蛋白,P<0.05)。瞬时共转染LAP表达质粒可明显增强PGL3-col及PGL3-col(△intron)报告基因在HSC中的表达(荧光素酶活性分别为587±62U/mg蛋白与315±45 U/mg蛋白及326±52 U/mg蛋白与220±70 U/mg蛋白 ......


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